【测评】lonza细胞转染技术报告

细胞转染的方法主要包括：人工脂质体法、磷酸钙法、DEAE-右旋糖苷法、电穿孔法、病毒转导法等，今天做个细胞转染技术大比拼，了解各种细胞转染的方法优缺点，再根据自己的实验要求选择理想的方法，获得漂亮的实验结果。

Lonza转染系统，一个神一般的存在

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把所有难转染的问题都解决掉是我的个性标签

❖转染技术❖

引用自Lonza官网

    NucleofectionTM 专利转染技术是基于利用电子脉冲在细胞膜上瞬间生成小孔的原理。配合使用优化好的转染程序与转染试剂不仅可将外源核酸物质导入细胞质，甚至还可让外源核酸直接通过核膜进入细胞核。NucleofectionTM转染效率最高可达到99%，研究者无需再为细胞转染低的问题而担心。

【电转仪】

❖ Lonza 4D细胞核转染系统❖

KEYWORD：模块化设计和导电性聚合物技术

    为了满足广大科研工作者的需求，Lonza公司于2010年底推出了革新的4D-Nucleofector细胞核转染系统。全新的4D Nucleofector细胞核转染系统采用模块化设计和导电性聚合物技术，为使用者提供更加灵活的选择和更先进的转染性能。

❖ Lonza 96-well Shuttle™ System❖

KEYWORD：中高通量的转染筛选

    96 shuttle是中高通量的转染筛选的平台。在具备Nucleofector高效转染、DNA直接入核、无需自行摸索复杂的电转条件等优势外，还具备转染速度快（＜5分钟/96孔）、可与自动化液体处理系统整合等特点。是中高通量细胞转染实验的理想选择。

❖HT Nucleofector高通量细胞核转染平台 ❖

KEYWORD：高通量、384中转染条件

    HT Nucleofector高通量细胞核转染平台使用384孔电转板，适合于高通量的筛选实验。在具备Nucleofector高效转染、DNA直接入核、无需自行摸索复杂的电转条件等优势外，还具备快速转染（1分钟/384孔）、每块板可最多设置384种转染条件、可与自动化工作站进行整合等特点，是高通量筛选实验的理想选择。

❖ Nucleofector2b是单孔的细胞核转染系统❖

KEYWORD：单孔、转染效率高、DNA直接入核、简单易用

    Nucleofector2b是单孔的细胞核转染系统。能实现将DNA、RNA等多种底物向原代细胞、干细胞、难转染细胞系的高效转染。具有转染效率高、DNA直接入核、简单易用无需自行摸索电转条件等优势。

【转染试剂盒】

❖ Amaxa Nucleofector细胞核转染系统❖   

    Amaxa®Nucleofector®技术是 Lonza(原Amaxa)公司的专利创新技术，它综合应用传统的电穿孔技术及细胞特异性细胞核转染液，通过调整优化的电转参数（内存转染程序），直接把外源基因导入原代细胞及细胞系的细胞浆和细胞核中。它不同于传统的电穿孔仪，因为它可以把外源基因直接导入核中，而且细胞存活率远远高于电穿孔仪。

    Nucleofector 技术是独一无二的，因为它可以直接将DNA转染到细胞核内，因此实现了因受到细胞分裂限制而一直困扰人们的原代细胞的高效率转染。在 Nucleofector核酸转染仪的帮助下，您可以在肿瘤研究、免疫学、组织工程学及心血管疾病研究领域中轻而易举地获得大于90％的高效率基因转染率。Nucleofector 核酸转染技术特别适用于转染原代细胞和难以转染的细胞系，如T细胞及PC-12细胞系等。

Nucleofector试剂盒包含两个溶液：Nucleofector溶液和添加剂。两者都是针对每个细胞类型来特异开发的。它们在核转染过程中提供了细胞友好的环境，支持DNA直接到达细胞核。Nucleofector溶液只与Nucleofector装置共同使用时，才能发挥作用。

产品优势

1.不依赖细胞的有丝分裂，适用于悬浮细胞、原代细胞等难转染细胞。

2. 高转染效率，直接将外源基因转入核内。

在某些细胞中Nucleofector的转染效率可以达到90%，与病毒感染同样有效。Nucleofector直接将DNA运送到细胞核中，因此，基因表达就可以立即开始，数小时内就可以完成转染和分析的全过程，对于细胞系来说2-6小时就可以分析，对于原代细胞则需要4-16小时。

3.可转染DNA、RNA或siRNA。

4.操作简单方便，Nucleofector转染技术操作不到1小时就能完成。

5.最广泛细胞类型，全球共享的细胞转染数据库不断扩大。目前已有1200余种细胞系高效转染，130余种原代细胞成功转染。

6.维持细胞生理功能。

Nucleofector 细胞核转染技术操作步骤  
整个操作过程只需四步，非常简单、高效。 
第1步：处理细胞，精确计数 
第2步：混合DNA、转染液，重悬细胞，加入转染杯 
第3步：将转染杯放入转染仪，按键选择相应程序，按"start"键开始转染，10秒钟左右 
第4步：取出细胞继续培养