水溶性CdTe量子点625QDs-MAb修饰2F11/ER抗体/蛋白单克隆抗体的制备过程
今天小编分析量子点荧光探针,一起看看吧:
量子点荧光探针的制备过程:
取1 mmolL的水溶性CdTe荧光量子点100 pul,加0. 05 molL的硼酸盐缓冲液400 pul,充分混合;配制1.3 mg/50 ul EDC偶联剂,取10 ul偶联剂加入上述体系中,活化 15 min;加入单克隆抗体 Pan CK20ug,混匀;室温反应2 h后,4℃孵育过夜;次日将反应物12 000 r/ min条件下离心 20 min并去除沉淀物;取上清用透析袋透析(母液PBS缓冲液,pH7.4),4℃避光透析4 h,透析过程中每隔1 h换Ⅰ次PBS缓冲液;透析结束后,吸出透析袋内液体,置于另一清洁的eppendorf管中,4℃冰箱保存备用。
采用直接免疫荧光方法对625QDs-MAb荧光探针进行了分析。不论采用低倍显微镜或高倍显微镜(HepG2细胞胞质中有均匀的鲜红色荧光,胞质和胞核边界清楚,背景清楚, CK的位置与免疫细胞化学染色相吻合;在阴性对照组中,没有发现有显著的荧光。结果显示,625 QD:- MAb探针对HepG2细胞 Pan CK蛋白的特异识别;结果表明,625QDs标记具有较高的荧光强度和特异性。
量子点是指具有小于或等于激子玻尔半径的半导体纳米颗粒。量子点的荧光有很好的调节作用,它能得到从紫外到近红外的任一个点的光谱,而且它的位移量很大。这种方法能改善发光强度,而且还能改善发光效率,使其发光时间延长10~20倍。
小编RL2023.1