T7 Endonuclease I 切割含切刻的双链DNA | MedChemExpress (MCE)

描述&优势：T7内切酶I识别和切割不完全配对DNA、十字形结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA，或以较慢的速度切割有缺口的双链DNA。这种酶在不匹配的碱基的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。

存储条件：-20℃，1 year

使用方法：

1) 分别以突变体DNA和野生型DNA为模板，PCR扩增含突变位点的片段，片段长度约500bp， 突变位点避免位于片段中间，便于区分切割后条带；
2) 变性退火PCR产物

3) 酶切反应：上一步反应液中加入0.5 μL T7 E1酶，37℃保温15-30min，立即加入DNA loading buffer终止反应，混匀后65℃保温10min，琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果

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注意事项：

1. 用T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时，必须控制酶量和反应时间。反应温度
超过42℃时，会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃，会导致酶活性降低。

2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。