流式细胞术荧光标记实验染料FITC/PE/APC
供应商:新维创
产地:重庆
在流式细胞术或荧光标记实验中,FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)和APC(别藻青蛋白)是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长,因此在选择染料进行配色时,需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配,并尽量减少荧光溢出和补偿问题。
FITC通道
推荐染料:FITC本身就是一种常用的绿色荧光染料,其激发波长为495nm左右,发射波长为515nm左右。此外,其他在绿色光谱范围内且能与FITC通道兼容的荧光染料也可以考虑,但需注意避免光谱重叠导致的荧光溢出。
应用:FITC通道常用于标记细胞表面的抗原或细胞内的某些成分,如CD4、CD8等T细胞标志物的标记。
PE通道
推荐染料:PE(藻红蛋白)是一种橙黄色荧光染料,其激发波长为565nm左右,发射波长为575nm左右。在PE通道中,除了PE本身外,还可以选择其他橙黄色或红色光谱范围内的荧光染料,但需确保它们不会与FITC或APC通道产生严重的光谱重叠。
应用:PE通道常用于标记细胞表面的其他抗原或进行多色流式细胞术中的另一种颜色区分。
APC通道
推荐染料:APC(别藻青蛋白)是一种红色荧光染料,其激发波长为630nm左右(也有说法为660nm),发射波长为660nm左右(也有说法为675nm)。在APC通道中,应选择红色光谱范围内且光谱特性与APC相匹配的荧光染料。
应用:APC通道因其较长的发射波长,常用于标记自发荧光较高的细胞或样本,以减少自发荧光的干扰。同时,APC也常用于多色流式细胞术中的另一种重要颜色区分。
注意事项
在选择染料时,除了考虑光谱特性外,还需要考虑染料的稳定性、毒性以及是否与实验中的其他成分发生反应。
在进行多色流式细胞术时,应充分利用仪器允许的全部荧光染料,并尽量选用多激光激发以减少荧光溢出和补偿问题。
尽量避免使用复合染料(如PE-Cy5等),因为它们可能在不同激光下产生多个发射峰,从而干扰其他通道的检测。
二苯并环辛炔修饰巯基 DBCO-SH
二苯并环辛炔修饰马来酰亚胺 DBCO-MAL
阿仑膦酸修饰二苯并环辛炔 Alendronate(ALD)-DBCO
生物素标记牛血清白蛋白 Biotin-BSA
二苯基环辛炔修饰磷酸三苯酯 DBCO-TPP
炔基修饰聚苯乙烯 PS-Alkyne