matlab酶活性随温度变化,温度对兰州鲇消化酶活性的影响

消化酶活性是反映鱼类消化生理机能的一项重要指标。国外先后报道了鳕(Dorosomacepedianum)[1]、虹鳟(Oncorhynchusmykiss)和欧洲鳗(Anguillaanguilla)[2]等鱼类消化酶活性的研究。国内学者也对中华鲟(Acipensersinensis)等6种鲟鱼[3]、大鳍(Mystusmacropterus)[4,5]、南方大口鲇(Silurusmeridionalis)[6]、鲇(Silurusasotus)[7]、鳜鱼(Sinipercachautsi)[8]、鲤(Cyprinuscarpio)[8,9]、草鱼(Ctenopharyngodonidellus)[8,10]等鱼类消化酶活性的最适温度、最适pH或消化酶活性的分布特点等方面进行了研究。兰州鲇(Siluruslanzhouensis),俗名黄河鲇,属鲇形目,鲇科,鲇属鱼类,主要分布于黄河中上游,渭河及陕北入黄河的河流下游,具有较高的经济价值[11,12]。兰州鲇肉质细嫩、味美,是鱼类的上品。但是由于黄河水域的污染,鱼类生长繁殖环境的恶化,加上过度捕捞,使兰州鲇资源日益衰退。有关兰州鲇的研究,仅见人工繁殖方面[13],对其消化生理的研究还未见报道。研究温度对兰州鲇消化酶活性的影响,旨在了解兰州鲇的消化生理特点,为兰州鲇的资源保护和人工养殖饲料的配制提供理论依据,也为鱼类消化酶的酶促反应动力学提供基础资料。1材料与方法11试验鱼2005年5月8日于黄河壶口至三门峡段购得兰州鲇活体,鉴定定种后共计23尾,体质健康,尾均重(295118)g。12样品处理及酶液的制备测定每尾鲇体重、体长后,在冰盘内解剖,取出胃、肠、肝胰脏3种器官,剔除脏器上的结缔组织和脂肪组织,并于第一回折和最后一回折处将肠划分为前、中、后三部分。纵剖胃及前、中、后肠,清除其内容物,用精密pH试纸测胃壁pH。用冰冻磷酸缓冲液(pH75)冲洗胃肠内容物,再用滤纸将其表面水分吸干,连同肝胰脏分别标号,置于液氮罐中保存备用。测定酶活性前,将冷冻保存的胃、肝胰脏及肠等取出,随机选取5尾兰州鲇的胃、肝胰脏、前肠、中肠和7尾兰州鲇的后肠,解冻后分别混匀并参照叶元土[6,9]和中山大学[14]的方法制备粗酶提取液,置于4的冰箱中保存待用。24h内分析完毕。13酶活性测定蛋白酶活性的测定采用福林-酚试剂法[6]。蛋白酶活性定义为:以酪蛋白为底物,在pH75和(301)条件下,每分钟催化生成1g酪氨酸的酶量为一个酶活性单位(U)。淀粉酶活性的测定采用次碘酸法[9]。淀粉酶活性定义为:以淀粉为底物,在pH75和(301)条件下,每小时催化生成1mg葡萄糖的酶量为一个酶活性单位(U)。脂肪酶活性的测定采用聚乙烯橄榄油乳化液水解法[15]。脂肪酶活性定义为:在pH75和(301)条件下,脂肪酶水解脂肪每分钟产生1g脂肪酸的酶量为一个酶活性单位(U)。测定时,每个样品平行测定4次,结果取其平均值。14温度设置用恒温水浴锅控制反应温度,共设置了以下7个温度梯度:15、20、25、30、374、2、47。pH为75(02mol/LpH75磷酸缓冲液)。2结果21温度对兰州鲇蛋白酶活性的影响从图1可以看出,兰州鲇各消化部位蛋白酶随温度的上升,活性升高,在42时均达到最大值,高于此温度,酶活性下降,甚至不能检出。比较各部位的蛋白酶活性,可以看出,在25~42的范围内,前、中肠酶活力最高,而后肠较低且与肝胰脏接近,胃蛋白酶活力最低。最适温度下(42),蛋白酶活力前肠中肠>后肠>肝胰脏胃。图1温度对兰州鲇蛋白酶活性的影响22温