盛夏好时节,梅季烟雨天!接连而来的暴雨预警严重阻碍了我们出门的步伐,既然如此,何不在实验室里大展拳脚,加速您标签蛋白质的研究呢?
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老话说的好,巧妇难为无米之炊,要做好标签蛋白质的纯化实验,首先得选择合适的填料和预装柱,以达到事半功倍的效果。我们今天就来看看 Cytiva 标签蛋白填料的大家族,一起 pick 最适合您蛋白质研究的填料吧!
蛋白标签(Protein Tag)
所谓蛋白标签(Protein Tag)是指利用 DNA 体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪、和纯化等。常用的标签有His、GST、Strep、MBP、Flag 和组合式的双标签。Cytiva 可为大家提供以下标签蛋白纯化的填料和多种规格的预装柱。
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His 标签蛋白填料简介
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His 标签蛋白填料的选择
01
科研微量分析和制备
Cytiva 经典 Ni 填料 Ni Sepharose 6 Fast Flow(FF)和Ni Sepharose High Performance(HP)适用于实验室级别目标蛋白的分析和制备。如需快速进行目标蛋白的捕获,可选择 Ni Sepharose 6 Fast Flow(FF)填料,它可帮助您节省一半的时间以提高课题研究的进度。如对蛋白纯度有较高要求,Ni Sepharose High Performance(HP)是您的不二选择,它的粒径更小,可在保证回收率的同时帮助您获得更高的蛋白纯度。
02
样品杂质成分复杂
TALON Superflow 填料螯合有 Co2+, 对His标签蛋白的选择性高于传统的 Ni填料,可获得更高纯度的目标蛋白,减少非特异性杂带的影响。并且,90 μm 大的凝胶颗粒降低了填料对样品预处理的要求,可直接使用细胞裂解液进行柱层析实验。
03
样品含有 DTT 或者 EDTA 等添加剂
Ni Sepharose excel 填料能够耐受高达 100 mM EDTA 和 10 mM DTT,特别适合使用在有添加剂和还原剂存在的样品以及真核细胞表达的分泌蛋白。此款类型填料无需去除 EDTA 即可使用含有培养基的蛋白组分进行柱层析实验,极大地简化实验流程,保护蛋白活性。同时,Ni Sepharose excel 填料支持不脱 Ni 的情况下直接进行 NaOH 清洗,防止交叉污染。
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GST 标签蛋白填料简介
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GST 标签蛋白填料的选择
01
Glutathione Sepharose 4B 填料
具有高载量的特点,载量高于 25 mg/ml,适合于浓度较高的蛋白样品进行柱层析实验,帮助您快速分离和稳定目标蛋白以更好的进行蛋白功能研究。
02
Glutathione Sepharose FF 填料
具有高流速的特点,支持高达 300 cm/h的流速,适用于快速捕获目标蛋白,以节约时间和人力成本,加速您课题的研究进度。
03
Glutathione Sepharose HP 填料
具有高分辨率的特点,凝胶粒径仅为 34 μm,适合具有高蛋白纯度需求的实验,可顺利衔接后续的蛋白分析检测实验。
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Strep(II)和两联 Strep(II)标签蛋白纯化
StrepTactin Sepharose HP和Strep-Tactin XT Sepharose 填料都可用于带有Strep(II)或者两联Strep(II)标签蛋白的纯化。
当您想要一步纯化即可获得 > 95% 的高纯度及回收率的目标蛋白的话,快来使用 Strep-Tactin XT Sepharose 填料吧!Strep-Tactin XT Sepharose 填料详细介绍可参阅前文《两个黄鹂鸣翠柳,一部纯化上青天---Strep-Tactin XT 踏春来袭》。
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MBP 标签蛋白纯化
MBP 标签也是一类促进蛋白增容表达的标签,主要应用在原核生物大肠杆菌中。Cytiva 可为您提供 Dextrinsic Sepharose HP 填料和 MBPTrap HP 预装柱,满足您的 MBP 纯化的多种需求。
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Dextrinsic Sepharose HP 填料颗粒粒径仅为 34 μm,载量可达 16 mg/ml,具有高分辨率的特点,可助您一步纯化即可获得很高的蛋白纯度的需求。
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双标签蛋白纯化
双标签蛋白纯化即目标蛋白的 N-和 C-端分别连接某种特定的标签序列,通过进行一种以上的亲和层析纯化达到您理想的纯度要求。双标签插入到目标蛋白表达序列中可促进目标蛋白的增溶性和特异性,适用于一些不稳定或疏水性强的蛋白质。
双标签蛋白纯化的填料选择,可参考以上标签填料的选择标准,并将不同的分离技术结合使用以达到目标蛋白的纯化和分离。更多实际案例和讲解可参阅原文《纯化新思路——构建双标签蛋白》。
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附:本次促销活动合作经销商名录
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