显微镜C接口_激光共聚焦扫描显微镜搭建DIY

“光路中设置有小尺寸的光栏（通常称为针孔-pinhole），该针孔仅允许焦平面的光线通过，阻挡非焦平面的光线进入探测器。”（蔡司）

之前在小木虫看到搭建光路的部分帖子，有句话我当初印象不是很深，但是现在体会觉得太对了！他说：”光路调整分粗调和精调“。不知道各位看官能否体会到这句话的要义，我目前的水平是这样理解的：粗调是指我们通过肉眼目视，大致让荧光光斑通过各个光学元件的中心；精调是指待测量的样品信号光通过调整各个光学原件的空间自由度（包括俯仰角，空间xyz位置等），使得APD光子计数达到最大值

技巧：

1. pinhole共聚焦小孔是核心元件，它的空间xyz轴位置也是要精密调整配合合适的滤波片才能最大化提高信噪比，原理可看我头像，来自蔡司zeiss^[1]。
2. 对于一般透明发光材料的三维重构-reconstruction：扫描出来的三维体数据用matlab的slice函数实现重构，很漂亮很有冲击力，可以挖掘物体不同深度的发光信息，类似医院体检的CT扫描

参考

1. ^https://www.zeiss.com.cn/microscopy/products/confocal-microscopes/lsm-900-for-materials-non-contact-surface-topography-in-3d.html