3蛋白wb_WB 也有潜规则？内参不对，实验白费

即便新兴蛋白检测工具层出不穷，WB 的地位依旧坚挺，但要做好却并不简单。如何避免各种高背景、非特异性、假阳性结果？你可以从实验设计必备对照——「内参」里找到答案。文末还有双十一「宠粉」活动！11.11~11.13 日，精美礼品天天送，快来参与吧~

什么是内参？

内参是指一种高表达或广泛表达的蛋白，且在各组织和细胞中的表达相对恒定，可作为 WB 技术分析蛋白水平的标准化参考。

为什么要使用内参？

在 WB 开始之前，常使用生物化学测定法(例如 Bradford，BCA 等)测定样品中的蛋白总量，确保在各孔加入等量蛋白。内参可帮助确认所有样品是否都已上样，各个孔的电泳是否正常工作，内参信号的分析也可鉴别出蛋白在 WB 实验中转膜的均一性。

此外，大多数杂志要求 WB 结果中有内参数据，只有当各孔之间的内参蛋白表达量相当时，在目标蛋白上观察到的改变才被认为是可靠的。

如何归一