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原创 基于seurat的分群结果使用scVelo进行轨迹(trajectory)分析
前两周我们聊到用RNA velocity进行细胞的轨迹(trajectory)分析,scVelo是现今使用最为广泛的、基于RNA velocity进行细胞轨迹(trajectory)的工具之一,它基于python。而seurat则是如今使用最广泛的对scRNA-seq数据进行预处理以及分群的工具,它基于R。因此在实践过程中,我们经常会遇见的一个问题,即如何在seurat上进行预处理和分群后,在scVelo上进行细胞轨迹(trajectory)分析。...
2022-06-27 23:07:45
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原创 如何获得hg38外显子的bed文件?
一、bed文件介绍bed文件是一种记录基因组不同(功能)区域在基因组上的位置以及其它注释信息的文本文件。它包含了由空格或者tab分隔的不同列,以记录不同的信息,每一行对应一个区域。它最早出现于人类基因组计划中,后被广泛应用。因为它不直接在基因组上进行标记和修改,在使用上更具效率。bed文件最开始并没有一个标准的格式,因此 UCSC Genome Browser 对它的描述逐渐成为了大家的参考标准。它最少为3列,最多可为12列。bed文件辅助 UCSC Genome Browser 对不同片段进行可视
2022-04-18 13:23:23
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原创 细胞轨迹(trajectory)分析——Monocle
今天,小L想聊一聊对scRNA-seq数据进行细胞轨迹(trajectory)分析的一个重要工具Monocle,及其进阶版Monocle2、Monocle3。scRNA-seq在研究胚胎、器官等的发育以及癌症的发生中都有着重要的作用。在对这些进行研究时,一个非常重要的分析就是细胞轨迹(trajectory)分析,即了解不同细胞类型之间的分化关系。但是scRNA-seq有破坏性的,在测序过程中,我们需要让细胞裂解,释放出细胞内的mRNA,将其逆转录成相应的cDNA进行测序。这就导致我们一旦对单细胞进行
2022-03-31 10:54:16
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原创 [scRNA-seq]doublets检测——DoubletFinder & scrublet (下)
在上一篇文章里我们聊到为什么要进行doublet检测以及DoubletFinder的基本原理。在这篇文章里,我们就来聊聊另一个doublet检测工具——scrublet的基本算法、它和DoubletFinder的使用比较,以及使用这两个工具的代码范例。上图是上篇文章聊到的DoubletFinder的算法示例图,scrublet的核心思想和DoubletFinder非常相近。它们的主要的区别在于第五步,即对于每一个细胞邻近细胞中人工模拟的doublet细胞分布的描述上。scrublet的作者认为当
2022-03-17 23:56:46
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原创 [scRNA-seq]doublets检测——DoubletFinder & scrublet (上)
现今最常用的单细胞RNA测序技术是通过形成一个个液滴,让一个液滴内包含一个细胞,对细胞进行裂解,释放mRNA,添加barcode再逆转录成cDNA最后进行批量测序的一个过程。在这一过程中,我们会给同一个液滴内的所有mRNA一个相同的barcode。因为我们假定一个液滴内仅包含一个细胞,因而拥有相同barcode、来自同一个液滴的mRNA,我们在分析中也会当成同一个细胞的数据。但在实际情况中,有一些液滴会包含超过两个或两个以上细胞,被称之为doublet或multiplet。因为同一个液滴内的mRNA会拥
2022-03-11 22:16:12
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空空如也
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