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死后间隔时间推断的新研究.pdf

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内容要点:

简称PMIETSDDDSHESCGEDNA主要缩略语英汉对照英文全称 中文全称Postmortem Interval 死后间隔时间Estimation ofTime Since Death 死亡时间推断Direct Digital Frequency Synthesis直接数字频率合成器Hematoxylin Eosin 苏木精伊红Single.Cell Gel Eiectrophoresis 单细胞凝胶电泳Deoxyribonucleic Acid 脱氧核糖核酸HeadDNA%Head Deoxyribonucleic Acid 头DNA百分比DnaseTLTMDMSoDeoxyribonucleaseoliveTailMoment脱氧核糖核酸酶尾长Oliver尾矩Dimethyl Sulphoxide 二甲基亚砜Na2EDTA Ethylene Diamine Tetraacetic Acid乙二胺乙酸二钠DisodiumPBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲生理盐水华中科技大学同济医学院 博士学位论文死后间隔时间推断的新研究华中科技大学同济医学院法医学系博士研究生:赵小红指导教师:张益鹄教授中文摘要死后间隔时间(postmortem interval,PMI)或称死亡时间推断(estimation oftime since death,ETSD)是法医病理学实际检案及研究工作的重点和难点之一。长期以来,国内外的学者们已采用多种技术与方法尝试PMI的推断,尤其是早期PMI的推断,如利用死后各种尸体现象、肌肉超生反应、玻璃体液钾离子浓度、死后血液的生化变化等,但其准确性常受到外界各种因素的影响,往往误差较大。至目前为止,尚无公认的简易实用、准确可靠的推断方法,尤其是中晚期PMI的推断方法更不尽人意。因此,本课题研究大鼠死后皮下肌肉组织电阻抗幅值和相位角的变化规律,以探讨生物电阻抗推断中晚期PMI的价值,试图发展一种简单方便、准确可靠的推断中晚期PMI的新方法;选择前期研究尚未用过的分析指标—leadDNA%,应用单细胞凝胶电泳技术检测大鼠死后脑、骨髓细胞核DNA降解随PMI的变化规律,以探索单细胞凝胶电泳技术推断早期PMI的新参数。第一部分大鼠死后皮下肌肉组织电阻抗幅值和相位角变化推断死后间隔时间的实验研究【目的】研究大鼠死后皮下肌肉组织电阻抗幅值和相位角的变化规律,探讨生物电阻抗技术推断中晚期PMI的价值,试图发展一种简单方便、准确可靠的2华中科技大学同济医学院 博士学位论文推断中晚期PMI的新方法。同时从肌肉组织形态学的角度初步分析了电阻抗幅值变化趋势产生的机制。【方法】取Wistar健康成年大鼠20只,分成4个实验组,每组5只,分别对应于四个不同的测量温度(9a:1℃、14士1℃、16土1℃、19a:l℃)。用颈椎脱臼的方式处死动物,将电极插入大腿部肌肉并固定。迅速将动物置于设定温度的恒温培养箱或冰箱中,利用四电极阻抗测量系统测量大鼠死后皮下肌肉组织电阻抗幅值和相位角。自死后Oh开始,每隔3h记录一次电阻抗数据(夜间关机时除外)和环境温度。当实验时间足够长时(阻抗下降到原始阻抗的70%左右或15天以上)便可停止实验。再用Excel对所得的离散阻抗数据进行简单的均值、方差分析,用MATLAB对阻抗数据进行相关分析和直线拟合并作图、计算相关系数。取前述4只实验大鼠(1只为死前对照组,3只为死后实验组),分别于死后12h、24h和72h在大鼠电阻抗测量部位皮下肌肉组织取材、常规制片、HE染色后,在光镜下观察组织形态学变化,并与其电阻抗的变化进行对比分析。【结果】l所有死亡大鼠皮下肌肉组织的电阻抗幅值都呈现出相似的先升后降的变化趋势,且中、长期的下降部分有一定的线性变化趋势。死亡初期(PMI=l~4天)电阻抗幅

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