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在传统的测序技术中,上机测序的样本是由多个细胞构成的,最后分析得出的结论也只是基于所有细胞的平均水平,但是我们知道细胞是具有异质性的,对于大脑等复杂组织而言,其细胞类型是多样的;对于肿瘤细胞而言,其细胞异质性更是尤为突出,为了克服细胞异质性的影响,提高科学研究的精度,科学家在不断尝试,希望从单个细胞的水平去进行测序分析。
从2009年开始,各种单细胞技术不断出现,最初由于其通量低,操作繁琐,价格高等一系列因素,导致其应用并不广泛,近年来随着技术的不断发展,通量在不断提升,价格也在不断下降,单细胞测序技术越来越成熟,出现了很多成熟的平台,比如本文要介绍的10X Genomics。
单细胞测序的应用领域非常多,比如CNV检测,ATAC_seq等, 其中引起广泛关注的,就是单细胞在转录组学的应用,即single cell RNA sequencing, 简称scRNA-seq。官方提供的流程如下

10X Genomics公司也为之提供了一系列配套的仪器和软件,最核心的就是分离细胞,制备文库的机器,叫做Chromium Controller, 图片如下

核心是通过构建GE

scRNA_seq是单细胞测序技术的一种,旨在克服细胞异质性,提高科研精度。10X Genomics的Chromium Controller在其中扮演关键角色,通过特定的 Gel Beads 和油滴技术实现单细胞分离与文库制备。该技术广泛应用于CNV检测、ATAC_seq等领域,尤其是单细胞转录组分析。整个过程包括细胞捕获、转录本扩增和文库构建,最终进行 Illumina 上机测序。
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