cas：2777084-88-3，Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin，SULFO-NHS-LC-脱硫生物素

基本概念

Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin是一种生物素衍生物，用于生物偶联和亲和纯化。其结构包含：

• Sulfo-NHS酯：水溶性活化酯，与伯胺（如赖氨酸）反应形成稳定酰胺键。
• LC（长链）间隔臂：增加空间位阻，提升与亲和配体的结合效率。
• Desthiobiotin：生物素类似物，与链霉亲和素结合较弱（Kd ~10⁻⁷ M），可用生物素竞争性洗脱。

结构式：

主要应用

蛋白质标记与纯化
通过Sulfo-NHS酯与蛋白质的伯胺基团共价结合，标记后的复合物可通过链霉亲和素树脂捕获。Desthiobiotin特性允许温和洗脱（如添加生物素），避免 harsh 条件损伤蛋白。

细胞表面标记
标记细胞膜蛋白时，长链间隔臂减少空间阻碍，增强标记效率。适用于活细胞研究，后续可裂解Desthiobiotin-链霉亲和素相互作用进行分离。

相互作用研究
用于pull-down实验，偶联诱饵蛋白后捕获结合伴侣，低pH或生物素溶液洗脱保留天然构象。

实验步骤

标记反应
溶解Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin于PBS（pH 7.2-7.4），加入目标蛋白（摩尔比10:1至20:1），室温孵育30分钟。用脱盐柱去除未反应试剂。

亲和纯化
将标记样本过链霉亲和素琼脂糖柱，结合后洗涤。洗脱缓冲液含2-5 mM生物素或pH 2.8甘氨酸缓冲液。

注意事项

• 避免含胺试剂（如Tris、NaN₃）干扰反应。
• 避光保存干燥试剂，Sulfo-NHS酯易水解，需现配现用。
• 优化标记比例以减少多标记导致的蛋白聚集。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体！
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