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原创 【泰克生物】蛋白药物适配体筛选技术:定制化治疗的前沿探索

泰克生物的专业团队不仅在文库构建、筛选优化和序列分析方面拥有深厚的专业知识,还能为客户提供全面的技术支持和解决方案,助力您的科研项目取得更大的成功。适体体外筛选技术涉及到多个关键步骤,包括核酸适体文库的合成、筛选条件的优化以及筛选结果的验证和分析。适体体外筛选技术结合核酸适体筛选和SELEX筛选服务,为研究人员提供了高效、精准的工具,用于发现能与特定蛋白药物高效结合的适配体。未来,随着对适体筛选技术的深入理解和应用,预计将会出现更加精确和高效的筛选方法,为蛋白药物适配体筛选领域带来新的突破和可能性。

2024-08-14 08:45:00 257

原创 【泰克生物】小分子药物适配体筛选技术:定制治疗的新前景

小分子药物适配体筛选依赖于适配体体外筛选和适配体文库筛选技术的结合。小分子适配体的体外筛选技术涉及到多个关键步骤,包括适配体文库的合成和优化、筛选条件的调整和优化,以及筛选结果的验证和分析。小分子药物适配体筛选技术作为生物医药领域的重要技术之一,通过小分子适配体的体外筛选和核酸适体文库筛选的结合,为药物开发和治疗提供了强大的工具。通过小分子适配体的体外筛选和核酸适体体外筛选技术,研究人员能够有效地发现与目标小分子药物高亲和力结合的适配体,为药物开发和治疗提供定制化的解决方案。小分子适配体的体外筛选技术。

2024-08-13 09:00:00 787

原创 【泰克生物】核酸适配体筛选 | SELEX筛选 | 核酸适配体文库设计 | 核酸适配体筛选技术综述

通过不断优化SELEX筛选技术、核酸适配体文库设计和核酸适配体序列设计,我们可以更高效地发现和应用核酸适配体,为科学研究和技术发展提供新的动力。该过程依赖于一个包含大量随机序列的核酸适配体文库,这些序列在与目标分子相互作用后,通过反复筛选和扩增,最终得到能够高效结合目标分子的适配体。核酸适配体筛选通常包括以下几个步骤:文库设计、靶标结合、分离未结合的核酸、扩增结合的核酸、反复筛选以及最终的适配体鉴定和验证。领域提供全方位的服务,包括核酸适配体文库设计、SELEX筛选以及核酸适配体序列设计。

2024-08-12 08:45:00 887

原创 【泰克生物】质谱测序 | 抗体测序 | 抗体可变区测序的技术进展与应用

通过精确的抗体测序,研究人员能够深入理解抗体的特异性和多样性,为开发高效、安全的抗体药物提供基础数据。抗体测序不仅能够揭示抗体的基因序列,还能提供抗体的多样性和特异性信息,为抗体工程和药物开发提供重要数据。我们采用高精度测序技术,准确解析抗体的基因序列,为抗体药物的研发、优化及生物标志物的研究提供坚实的数据支持,加速生物科技领域的创新与发展。3. 组合测序技术:结合NGS和质谱测序,研究人员能够获得更全面的抗体序列和结构信息,提高抗体测序的准确性和深度。质谱测序在抗体可变区测序中的应用。

2024-08-10 09:15:00 750

原创 【泰克生物】单克隆抗体从头测序 | 杂交瘤测序的技术进展与应用

同时,泰克生物配备了先进的抗体全长测序技术,例如与串联质谱联用的液相色谱仪 (LC-MS/MS) 和配套的先进计算算法,可根据您的需求提供准确、快速的抗体全长测序服务。杂交瘤测序和单克隆抗体从头测序是现代生物技术中的关键技术,能够深入分析和优化抗体的结构和功能。通过先进的抗体测序技术和抗体从头检测,研究人员能够推动抗体药物开发和个性化治疗的进步,为患者提供更精准和有效的治疗选择。通过单克隆抗体从头测序和抗体测序技术,研究人员可以更好地理解和优化抗体的功能,为抗体药物开发和个性化治疗提供支持。

2024-08-09 09:15:00 213

原创 【泰克生物】抗体测序|蛋白质测序|抗体从头测序|质谱测序的应用与技术进展

抗体从头测序中,质谱技术面临着复杂性和样品准备的挑战,但其能够提供全面的抗体结构信息和多样性分析,对抗体工程和个性化治疗具有重要意义。通过质谱技术的应用,我们能够更深入地探索抗体和蛋白质的生物学特性,推动新型药物的研发和临床应用。这些方法通过对蛋白质样品的离子化和分析,实现对蛋白质结构和序列的高效测定,为生物医学研究提供了强大的工具。我们采用高精度测序技术,准确解析抗体的基因序列,为抗体药物的研发、优化及生物标志物的研究提供坚实的数据支持,加速生物科技领域的创新与发展。

2024-08-08 17:31:48 371

原创 抗体测序的重要性与应用【泰克生物】

同时,泰克生物配备了先进的抗体全长测序技术,例如与串联质谱联用的液相色谱仪 (LC-MS/MS) 和配套的先进计算算法,可根据您的需求提供准确、快速的抗体全长测序服务。抗体测序是研究抗体结构、功能及其在免疫应答中作用的关键技术,涉及到抗体全长测序、抗体氨基酸测序、蛋白质测序以及杂交瘤测序等多个方面,对于深入理解抗体生物学和开发新型治疗药物具有重要意义。杂交瘤测序是指对杂交瘤细胞中抗体基因的测序分析,通过对单克隆抗体生产细胞的遗传信息和抗体表达特性进行分析,帮助确定高效生产单克隆抗体的最佳细胞系和工艺条件。

2024-07-24 10:00:00 308

原创 Adc抗体偶联|被称为『生物导弹』的抗体偶联药物是何来头?【泰克生物】

ADC偶联药抗体的研发始于对抗体偶联技术的深入探索。通过精确的先导抗体发现和优化,研究人员能够选择出具有高亲和力和特异性的抗体,以及适合偶联化学反应的毒性药物。这一过程中,ADC药物研发生产的关键在于如何平衡抗体的结构稳定性与药物的效力,以实现最佳的治疗效果。ADC作为抗体药物偶联技术的代表,不仅提升了癌症治疗的精准度和效果,同时也为生物制药领域带来了全新的治疗策略和机会。抗体药物偶联(ADC)被誉为治疗癌症的生物导弹,融合了特异性抗体的精确靶向性和毒性药物的高效杀伤性,为癌症治疗带来了革命性的突破。

2024-07-23 09:15:00 764

原创 抗体药物偶联(ADC):靶向治疗的新兴先导技术【泰克生物】

ADC的研发不仅需要考虑到药物在体内的代谢和清除,还需克服抗体的免疫原性和药物的毒性问题,以确保其在临床上的安全性和有效性。未来的研究将继续致力于优化ADC的设计和生产工艺,以应对复杂的临床挑战并提升治疗的效果。这些ADC抗体偶联药物通常由三部分组成:抗体、链接剂和毒性药物,它们的精确配比和构建对于药物的最终疗效至关重要。抗体药物偶联(ADC)作为一种靶向癌症治疗的创新方法,将特异性抗体与毒性化学药物有效结合,以实现精确的癌细胞杀伤,极大地提高了治疗的疗效和安全性。和其他生物偶联物的开发。

2024-07-22 09:00:00 336

原创 鼠单抗人源化技术的进展与应用【泰克生物】

通过鼠单抗人源化改造、小鼠抗体人源化、人源化抗体设计和人源化抗体技术的综合应用,科学家们能够开发出更具有临床应用潜力的抗体药物,为人类健康带来更大的益处。基于噬菌体展示技术平台,泰克生物能够提供高亲和力和低免疫原性的嵌合抗体改造服务,并且能对抗体序列进行人源化改造并确保改造后的人源化抗体亲和力能与人源化之后的抗体维持在同一数量级水平,为客户的后续项目研究带来便利。未来,随着技术的不断演进和理解的深入,人源化抗体技术将继续发挥重要作用,促进生物医药领域的持续创新和进步。

2024-07-19 08:45:00 1342

原创 抗体人源化技术的现状与应用【泰克生物】

在人源化单抗制备过程中,科学家们通常利用抗体的三维结构信息进行精确的氨基酸替换和优化,以确保抗体在人体内具有最佳的功能和最低的免疫原性【3】。抗体人源化改造的主要方法包括将抗体的恒定区替换为人类恒定区,并对抗体的可变区进行优化,以保持其特异性和亲和力【1】。基于噬菌体展示技术平台,泰克生物能够提供高亲和力和低免疫原性的嵌合抗体改造服务,并且能对抗体序列进行人源化改造并确保改造后的人源化抗体亲和力能与人源化之后的抗体维持在同一数量级水平,为客户的后续项目研究带来便利。

2024-07-18 16:01:05 891

原创 人鼠嵌合抗体定制:定制化抗体的设计与表达【泰克生物】

随着技术的不断进步,相信人鼠嵌合抗体在生物医学研究和药物研发中将发挥越来越重要的作用,为新药的开发和治疗效果的提高带来新的可能性。本文将介绍人鼠嵌合抗体的设计与表达方法,重点关注嵌合抗体定制服务在抗体研究和应用中的应用。嵌合抗体设计服务公司是专业提供抗体定制服务的机构,能够根据客户的需求设计出符合要求的人鼠嵌合抗体。人鼠嵌合抗体定制是通过将人源和鼠源的抗体基因进行重组,构建出具有人鼠嵌合结构的抗体基因。嵌合抗体基因构建:将人源和鼠源的抗体基因进行重组,构建出人鼠嵌合抗体基因。嵌合抗体定制服务的应用与前景。

2024-06-28 09:15:00 214

原创 嵌合Fab和F(ab‘)2抗体:定制抗体的制备与应用

嵌合Fab和F(ab')2抗体是一类具有重要生物学功能和药物研发应用的蛋白质,在抗体定制领域具有广泛的应用。本文将介绍嵌合Fab和F(ab')2抗体的制备方法,重点关注定制抗体公司在嵌合抗体制备中的应用。

2024-06-27 08:45:00 401

原创 重组人鼠嵌合抗体定制:定制化抗体的制备与应用

嵌合抗体是一类具有广泛应用价值的蛋白质,在生物医学领域中发挥着重要作用。本文将介绍嵌合抗体的生产服务,重点关注嵌合抗体表达、嵌合抗体CRO服务公司和抗体定制服务的技术原理和应用。

2024-06-26 08:45:00 298

原创 嵌合抗体生产服务:定制抗体的制备与表达

嵌合抗体是一类具有重要生物学功能和临床应用前景的蛋白质,在药物研发和生物医学研究中具有广泛的应用。本文将介绍嵌合抗体的表达方式,重点关注嵌合抗体生产服务及其在抗体定制中的应用。

2024-06-25 09:15:00 258

原创 哺乳细胞重组表达人鼠嵌合抗体:制备与应用

重组抗体是一类具有广泛应用价值的蛋白质,在药物研发和生物医学研究中发挥着重要作用。本文将介绍重组抗体的表达方式,重点关注嵌合抗体制备和哺乳细胞重组表达人鼠嵌合抗体的技术原理和应用。

2024-06-24 09:15:00 174

原创 嵌合抗体设计与表达服务:哺乳细胞重组表达的利器

嵌合抗体是一类具有重要生物学功能和药物研发应用的蛋白质,其设计和表达对于相关研究至关重要。本文将介绍嵌合抗体设计与表达服务的原理和方法,重点关注哺乳细胞重组表达的技术进展和应用。

2024-06-21 18:47:34 194

原创 酶酵母展示技术简介

基于酵母展示技术,泰克生物能够为客户提供高质量的酶突变文库酵母展示服务,且酵母文库库容可达10^7-10^8,文库多样性、插入率、阳性率均可达90%以上,满足各类客户对于酶酵母展示文库的质量要求。通过利用酵母表面展示技术,可以将目标酶直接展示在酵母细胞表面,实现对酶的高效催化和定向进化。酶的酵母展示服务为酶研究和应用提供了一种创新的方法和平台。随着技术的不断发展和应用范围的扩大,相信酶的酵母展示服务将在各个领域展现出更广阔的应用前景,为科学研究和工业生产带来更多的可能性和机遇。

2024-06-10 15:56:56 316

原创 探索纳米抗体免疫原制备的技术难点:蛋白、小分子和多肽的挑战与解决方案-泰克生物

泰克生物可以提供多种免疫原制备的纳米抗体生产服务,为广大科研用户提供一站式服务。

2024-05-11 19:46:54 430

原创 抗体亲和力成熟制备高亲和力抗体-泰克生物

在体液免疫中,再次反应所产生的抗体比初次免疫反应平均亲和力高的现象,就称为抗体亲和成熟。平衡解离常数 KD((质量摩尔浓度/升)可以评估抗体亲和力大小,其计算公式为: KD=([Ab][H])/[Ab•H],其中[]表示摩尔浓度,Ab 表示抗体, H 表示抗原/半抗原,Ab • H 表示抗体与抗原/半抗原的结合物。因为高亲和力抗体的高活性和复合物的稳定性,高亲和力抗体在免疫化学技术中的使用效果更好——如低亲和性抗体结合小分子蛋白抗原的解离时间仅为数分钟,而高亲和性抗体解离半衰期在30min 以上。

2024-01-31 11:19:21 1055 1

原创 嵌合抗体介绍-泰克生物

然后,双酶切表达载体pcDNA3.1-CA-VL和纯化的VH,分离纯化相应的酶切片段,重复上述步骤,构建成重组表达载体pcDNA3.1-CA-XX(抗原单词的首字母)。转染72h后,加含MTX的选择性培养基进行筛选。嵌合抗体目前主要用于药物治疗方面,与鼠抗相比,嵌合抗体既保留了鼠源可变的高亲和性,又具有人Fc段的多种免疫杀伤功能,从而大大降低了人抗鼠抗体反应的发生几率,改善了临床治疗效果,与其它小分子基因工程抗体相比,嵌合抗体作为完成的抗体分子,在体内半寿期更长,并具有人Fc段的多种免疫杀伤功能。

2024-01-31 11:09:12 925

原创 抗体全长测序-泰克生物

首先要选择高峰度的肽段,其实是判断肽段二级离子的碎裂。(1)肽段覆盖率基于特异性和非特异性蛋白酶(Trypsin、Chymotrypsin、Glu-C、Lys-C、Pepsin、Elastase等)分别对蛋白样品进行酶切,使蛋白覆盖率达到100%和产生丰富的、重叠度高的肽段类型,最终得到测序所需的高质量数据。先对样品进行多酶解实验,将酶解后的肽段进行质谱检测,数据采集后的质谱图用de novo算法进行解析并获得对应的肽段序列,经过肽段间的比对拼接,从蛋白N端到C端拼装出来,得到蛋白的氨基酸序列。

2024-01-31 11:01:02 919

原创 改型抗体-泰克生物

尽管鼠框架区的其余部分可以从某个人FR中搬移过来,毫无疑问,这样得到的人源化抗体序列和人抗体的保守序列(Consensusse-quences)在一些位置上有差别。FR序列基本保守,在不同的抗体间具有较高的同源性。抗体人源化是重组抗体生产制备实验研究的重要组成部分,获得高特异性和亲和性的人源化抗体,对很多疾病进行有效的抗体治疗具有重要作用。泰克生物拥有成熟的抗体人源化技术,能对抗体序列进行人源化改造并确保改造后的人源化抗体亲和力维持在同一数量级水平,我们提供有保障的人源化服务,能为您的实验带来便利。

2024-01-31 10:53:22 827

原创 噬菌体展示ELISA鉴定的抗体选择

除了标签抗体,噬菌体表面展示有时候还会用到M13抗体,接下来我们介绍一些M13重组抗体的商品情况:抗M13 的M13 Major Coat Protein(RL-ph1, IgG2b kappa light chain单克隆克隆抗体),M13酶标抗体(Anti-M13(HRP)Antibody),M13 g8p 抗体和HRP 酶标 M13 抗体(arigo)。这里只展示了一些载体的图谱,但通过这些载体的组成,我们可以了解到:用噬菌体展示技术制备抗体时,选择的噬菌体或嗜菌粒表面展示载体通常都带有标签蛋白——

2024-01-25 10:54:55 823

原创 重组片段抗体表达介绍-泰克生物

从免疫得到的脾脏B细胞中提取总mRNA,通过逆转录得到cDNA,再通过特定的引物以cDNA作为模板扩增出轻链可变区和重链可变区DNA,再通过重叠PCR将轻链可变区和重链可变区通过Linker连接,得到总的ScFv基因,将ScFv 基因连接到pIT2噬菌体载体(含抗性基因),再转化到大肠杆菌(Ecoli TG1)中,这样一个ScFv库就初步建成了。其由完整的轻链(可变区和恒定区)和部分重链结构(可变区和一个恒定区片段)组成,轻链与重链通过一个二硫键连接,体积较小,分子量为47-48 kDa。

2024-01-24 09:45:00 1653

原创 重组抗体表达FAQ-泰克生物

①已知抗体的基因序列,将序列克隆到表达载体上,导入到哺乳动物细胞体内培养,通过一系列的筛选简单最终获得能够稳定生产此抗体基因的稳定细胞系,这一过程需要大量的时间,才能筛选出足够稳定表达的细胞系,并能够在后续实验中稳定长期生产。我们具有完善的重组抗体表达生产平台,丰富的重组蛋白和重组抗体表达经验,基于噬菌体展示技术,我们能够为客户提供优质的重组抗体制备和筛选服务。(2)一致性高、重复性好:重组抗体的基因是确定的,抗体生产是可控且可靠的,使得抗体的批次间差异小,重复性好;(2)具有更高的生长密度、转染效率高;

2024-01-23 08:45:00 910 1

原创 动物免疫(羊驼免疫)-泰克生物

这些只有重链的抗体在功能上与常规抗体相似,却具有尺寸小、耐高温和稳定性强、以及组织穿透能力强等优势,正是由于这些特性,使得纳米抗体在生物医药、科研、诊断以及其他多个领域突显出巨大的潜力。此外,免疫方案、佐剂的选择、免疫时间表、免疫原剂量等都需要根据特定的项目需求进行定制。1、生物物理属性:羊驼纳米抗体的尺寸小能够到达传统抗体难以触及的细胞内部和组织深处,并且羊驼纳米抗体在极端的温度和pH值下展现出优异的稳定性,具有高水溶性,且适合多种应用场景,使其成为许多传统抗体无法胜任的应用的理想选择。

2024-01-22 09:00:00 1020 1

原创 浅谈重组IgG抗体表达-泰克生物

①已知抗体的基因序列,将序列克隆到表达载体上,导入到哺乳动物细胞体内培养,通过一系列的筛选简单最终获得能够稳定生产此抗体基因的稳定细胞系,这一过程需要大量的时间,才能筛选出足够稳定表达的细胞系,并能够在后续实验中稳定长期生产。当使用人源的免疫细胞(或组织)得到的人抗体可变区基因片段构建噬菌体库,然后利用特定抗原进行展示库的筛选,即可获得针对某抗原的人源抗体片段及对应的基因序列,最后通过体外蛋白表达及筛选即可得到包含人抗体重链和轻链的特异性全人抗体。抗体的可变区来自鼠单克隆抗体,而恒定区则来自人的抗体。

2024-01-20 09:53:38 1251

原创 表面重塑抗体技术介绍-泰克生物

利用Swiss-Pdb Viewer 3.7的Interactive fit 功能将抗体VH、VL以该抗体结构为模板进行空间拼接,所有结果使用Gromos96力场的Force Field 计算能量值,将最小能量值的对接模型使用Discover在Cvff力场下进行分子力学优化,得到精确的三维模型。进一步通过三维模建、分析抗体可变区分子内与分子间氢键作用位点和表面可及性基础上,去除参与氢键形成与疏水性核心残基,在确保抗体结构完整与亲和力的原则上完成抗体可变区的人源化改造。

2024-01-19 13:38:38 398 1

原创 纳米抗体重组表达系统介绍-泰克生物

基于完善的重组抗体表达平台,泰克生物能够为客户提供包括但不限于驼源、羊源、鼠源等不同物种的单克隆抗体(包括但不限于VHH抗体、scFv抗体、Fab抗体、嵌合抗体、人源化抗体及各种类型的Fc融合重组抗体)重组表达制备服务,及其配套的完整可追溯性文件体系。泰克生物的CHO-K1、Expi 293F等哺乳动物细胞宿主体系配合自主设计的分泌型高表达载体及各种规格的放大表达体系,能够为客户提供高质量的重组抗体表达服务,满足各类客户的科研和生产需求。表达水平方面,对表达系统、宿主、载体的选择及培养条件的优化等。

2024-01-19 09:15:00 864 1

原创 抗体人源化介绍-泰克生物

1. 嵌合抗体:嵌合抗体是利用DNA重组技术,将异源单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中,转化哺乳动物细胞表达出嵌合抗体,这样表达的抗体分子中轻重链的V区是异源的,而C区是人源的,这样整个抗体分子的近2/3部分都是人源的。这样产生的抗体,减少了异源性抗体的免疫原性,同时保留了亲本抗体特异性结合抗原的能力。4. 全人源化抗体:全人源化抗体是指将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术,将人类编码抗体的基因全部转移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中,使动物表达人类抗体,达到抗体全人源化的目的。

2024-01-18 10:02:20 488

原创 纳米抗体文库的选择-泰克生物

免疫纳米抗体文库就是要用特异的抗原对驼科动物进行免疫,通常需要免疫5次,大概需要6-8周,免疫之后取颈静脉血,分离PBMC/淋巴细胞提取rna,反转录获得cDNA,扩增VHH基因序列,将基因序列克隆至噬菌体展示载体,转化大肠杆菌即可获得免疫文库,文库库容通过长出的转化子个数来确定。为了构建一个库容较大且文库多样性丰富的天然纳米抗体文库,需要同时从不同的驼科动物抽取大量颈静脉血(如果想获得10^10不同的VHH克隆,大概需要大于10升的血液),这也导致工作量的增加。将获得亲和成熟的 Nbs。

2024-01-18 09:59:53 1319

原创 纳米抗体重组表达-泰克生物

单克隆抗体是一种结构复杂的多聚体蛋白,想要具有生物学功能,需要复杂的折叠机制以及适当的翻译后修饰,因此,更适合用真核系统表达,但大规模生产操作复杂且费用高昂,而纳米抗体(Nanobodies,Nbs)的结构简单,在没有修饰以及可结晶片段(Fragment crystallizable,Fc)存在的情况下仍具有活性,更适合在多种微生物表达系统中生产。2、大肠杆菌周质维持在氧化状态,较少的细胞质维持在还原状态,有利于二硫键的形成,可以促进外源蛋白的正确折叠,从而维持结构的稳定;

2024-01-17 09:30:00 526

原创 抗体文库细胞筛选-泰克生物

在培养皿中培养抗体库中不含目标受体的空白细胞,去除非目标抗体(即阴性筛选),然后用未吸附的噬菌体与目标细胞结合,获得与目标细胞结合的抗体(即阳性筛选),经过几轮“阴性筛选-阳性筛选-扩增”,就能富集出特异性抗体。全细胞筛选法可应用于寻找新的受体、配体及抗原表位分析,新型肽苗的开发,基因治疗靶向载体的筛选,肿瘤靶向治疗载体的筛选,酶受体激动剂和拮抗剂的开发,疾病的检测及治疗等多个方面。(8) 侵染:取3支无菌的离心管,分别加入活化好的2738菌液,及稀释的洗脱产物(一个梯度一支管),在37°C放置1.5h。

2024-01-16 13:42:22 954 1

原创 纳米抗体制备的免疫细胞收集-泰克生物

粒细胞(嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞),肥大细胞,单核细胞(发展成巨噬细胞),中性粒细胞,树突状细胞(DC是一种重要的抗原呈递细胞(APC),也可以由单核细胞发育而来),自然杀伤细胞(NK具有先天免疫和适应性免疫的双重特性,可以保留为记忆细胞)。B细胞(有两个主要功能: ① 向T细胞提供抗原,② 产生抗体来中和感染性微生物。)T细胞(有多种作用,并按亚群分类。T细胞分为两大类: CD8+ T细胞或CD4+ T细胞)。

2024-01-15 16:02:15 927

原创 纳米抗体文库筛选(固相筛选)-泰克生物

具备多种筛选体系,包括直接筛选法、竞争法、负筛选法、细胞筛选法等,可提供VHH筛选、scFv序列筛选、Fab抗体筛选等,满足不同客户的不同需求。产品交付标准高:针对免疫库,交付免疫前后血清,抗体展示文库,筛选洗脱产物,CDR区域补充度的纳米抗体序列,QC质控标准(含RNA提取,cDNA制备等)。随着噬菌体抗体库的应用范围不断扩大,可用于筛选抗体的抗原形式也是多样发展的,可以是病理切片、完整的细胞,甚至是活体动物的器官。该方法简单,技术成熟,比较容易获得高亲和力的抗体,筛选的效率与靶抗原的纯度相关。

2024-01-13 09:15:00 1171 1

原创 纳米抗体液相筛选相关问题-泰克生物

第一轮筛选尤为重要,其目的是从构建的文库中捕获尽可能多的阳性克隆,同时去除非特异性克隆,筛选时应使用多孔后涂层靶标或大量可溶性靶标,以确保捕获大量结合噬菌体,从而保持文库的多样性。在噬菌体抗体库的筛选过程中,会存在一些非特异性结合,如果一直使用单一筛选方法,这些非特异结合的噬菌体也同样被解离和扩增,从而被保留下来。抗原通过物理吸附直接固定在固相介质表面,蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合,主要靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,因此疏水氨基酸丰富的区域更容易吸附。

2024-01-12 09:00:00 585

原创 纳米抗体文库筛选(液相筛选)-泰克生物

可以将固定化金属亲和层析(IMAC)技术引入到噬菌体抗体库的筛选中,将纯化的带有His标签的抗原与噬菌体抗体库混合,噬菌体抗体与抗原充分结合后再加入亲和介质,使噬菌体抗体抗原复合物通过His标签与介质结合,然后通过充分洗涤去除非特异性噬菌体抗体,最后将特异性噬菌体抗体解离下来,感染TG1,在进行下一轮筛选,是一种改进的液相筛选方法。其次,抗原可以保持其空间构象,并且噬菌体抗体可以结合抗原所有的表位,而在固相筛选中,抗原有可能因吸附在固相介质上而导致部分表位的丢失。保证抗体偶联的正确方向。

2024-01-11 14:11:44 436

原创 纳米抗体文库构建—泰克生物

(4)1h后,将菌液收集到50mL离心管,25°C,4000rpm离心10min,用5mLSOC重悬菌体,取出50 μL用以梯度稀释,以便测定库容。(3)电击结束后加入SOC培养基1 mL,吹打电击杯,转入37 °C预热的锥形瓶中,最后再用2 mL SOC培养基将所有电击杯洗刷一-次,转入锥形瓶,37 °C摇床培养1 h;(7)弃上清,每个管中加入10 mL 10%甘油重悬菌体, 4 °C, 4000 rpm离心15 min,弃上清,用枪吸去残留液,加入10%甘油至终体积1 mL。

2024-01-10 18:42:38 294

原创 PBMC分离—泰克生物

淋巴细胞和单核细胞的比重小于分层液比重,离心后漂浮于分层液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分层液中,吸取分层液液面的细胞,就可从外周血分离到单个核细胞。中层为淋巴细胞分离液,在上、中层界面处有一处以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带,单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。1. 细胞活率高:实验中使用的分离试剂无菌、低内毒素,对细胞无伤害刺激,操作人员具备多年PBMC细胞分离经验,最大程度保证细胞的原始状态,分离后的新鲜细胞或冻存复苏后的活率可达90%以上。6.细胞活力检测:死的细胞可被染成蓝色,活细胞不着色。

2024-01-10 10:49:16 759

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