在酵母表达系统中,载体的选择非常重要,因为载体决定了目的蛋白的表达效率、蛋白质的加工和修饰等。以下是几种常用的酵母表达载体及其特点和选择原因:
第一种:pPICZ系列载体:这是Invitrogen公司开发的用于酿酒酵母表达的载体。pPICZ载体含有AOX1启动子,可实现目的基因的高水平表达。该载体还含有Zeocin抗性基因,方便筛选含有目的基因的转化子。
第二种:pYEX系列载体:是Clontech公司开发的用于酵母表达的载体。pYEX载体使用组成型启动子,可实现目的基因的稳定表达。此外,该载体含有金属离子抗性基因,方便筛选含有目的基因的转化子。
第三种:pYES2.0载体:这是Invitrogen公司开发的用于酿酒酵母表达的载体。pYES2.0载体含有组成型启动子,可实现目的基因的稳定表达。此外,该载体含有URA3基因,方便筛选含有目的基因的转化子。
第四种:pYES2/CT-LEU载体:这是Invitrogen公司开发的用于酿酒酵母表达的载体。pYES2/CT-LEU载体含有组成型启动子,可实现目的基因的稳定表达。此外,该载体含有LEU2基因,方便筛选含有目的基因的转化子。
第五种:pHIL-D2载体:这是Promega公司开发的用于毕赤酵母表达的载体。pHIL-D2载体含有强组成型启动子,可实现目的基因的高水平表达。此外,该载体含有HIS4基因和MEL1基因,方便筛选含有目的基因的转化子。
在#重组蛋白表达服务#过程中,选择酵母表达载体时需考虑的因素包括:目的蛋白的表达水平、蛋白质加工和修饰、载体的稳定性、筛选标记以及生产成本等。此外,还应考虑宿主菌的特性、培养条件以及表达产物的纯化难易程度等因素。