重组蛋白技术平台
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卡梅德生物
卡梅德生物专业提供抗体发现,重组蛋白和重组抗体表达服务。是一家专业的CRO服务供应商。
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Bradford蛋白定量法简介-卡梅德生物
Bradford蛋白定量法是一种常用的生物化学方法,用于测定溶液中蛋白质的浓度。这种方法因其简便性、快速性和经济性而被广泛应用于实验室。它基于布拉德福德试剂(含Coomassie Brilliant Blue G-250染料)与蛋白质结合时引起的颜色变化来进行蛋白质浓度的测定。Bradford方法的关键在于Coomassie染料在酸性环境中与蛋白质的肽链结合。染料分子在与蛋白质结合后从红色变为蓝色,并在595 nm处表现出最大吸收。原创 2024-06-05 14:00:00 · 277 阅读 · 0 评论 -
BCA蛋白定量法简介-卡梅德生物
BCA(Bicinchoninic Acid)蛋白定量法是一种广泛使用的生化分析技术,用于测定样品中的总蛋白质含量。它基于两种化学物质的反应:铜离子(Cu^2+)和双邻二氮杂菲(Bicinchoninic Acid,BCA)。该方法的优点是操作简单、灵敏度高且适用于大多数蛋白质样品,因此在生物实验室中非常常见。BCA法的核心是铜离子与蛋白质中的肽键反应生成一氧化铜(Cu^1+),一氧化铜随后与BCA反应形成一个紫色的复合物。原创 2024-06-05 09:15:00 · 520 阅读 · 0 评论 -
重组蛋白的定量定性方法,你了解吗?
重组蛋白的定量和定性分析是蛋白质工程和生物技术中至关重要的步骤,用于确保蛋白质的表达、纯度和功能性符合预期。以下是小编整理的一些常用的方法以及实验介绍,希望这些方法帮助研究人员详细了解重组蛋白的特性。原创 2024-06-04 09:00:00 · 601 阅读 · 0 评论 -
重组蛋白表达中的常用标签简介-卡梅德
GST-tag是融合格鲁塔硫醇S-转移酶(Glutathione S-transferase)的序列,这种标签不仅有助于提高目标蛋白的溶解性,还可以通过谷胱甘肽亲和层析轻松纯化。此外,GST-tag还可以增强蛋白质的表达量和抗降解性,适用于在大肠杆菌等原核表达系统中的蛋白质生产。His-tag对蛋白质的生物活性影响较小,常用于需要后续活性检测的蛋白质表达。: AP-tag涉及碱性磷酸酶,它不仅可以帮助蛋白质折叠成正确的空间结构,还可以作为标记来检测蛋白质的表达和定位。原创 2024-05-31 09:00:00 · 192 阅读 · 0 评论 -
哺乳动物细胞体外高通量表达抗体的应用
在哺乳动物细胞体外表达抗体的过程中,首先需要构建包含抗体基因的表达载体,并将其导入选择的宿主细胞,常见的宿主细胞包括CHO(中国仓鼠卵巢细胞)和HEK293(人胚肾细胞)等。这些细胞株不仅具有高效的蛋白质生产能力,还能进行必要的生物修饰,保证抗体的功能性和多样性。这种表达系统利用了哺乳动物细胞天然的生物学特性,可以进行正确的蛋白质折叠、糖基化和其他后翻译修饰,这些都是确保蛋白质生物活性和稳定性的关键因素。在这些研究中,科学家们依赖哺乳动物细胞所提供的复杂和精确的蛋白质修饰,以揭示蛋白质在疾病中的作用机制。原创 2024-05-30 14:59:13 · 172 阅读 · 0 评论 -
原核表达载体如何选择?-卡梅德生物
卡梅德生物小编报道:在重组蛋白原核表达系统中,选择合适的载体是至关重要的,因为它直接影响到目的蛋白的表达水平、可溶性以及纯化难易程度。原创 2023-12-29 09:32:03 · 477 阅读 · 0 评论 -
原核表达载体构建-卡梅德生物
本文将详细介绍原核表达载体构建的基本原理、流程、方法和注意事项,为研究人员提供一份指南,以实现对目标基因的高效表达和定制化调控。原创 2023-12-31 14:00:00 · 996 阅读 · 0 评论 -
载体构建技术
将单克隆菌落挑至含有相应抗性的1.5 mL EP管中培养4~5 h,按照扩增目的片段所用的PCR体系加入各组分,其中将模板DNA为菌液(体积1 µL),同时设置水为模板的阴性对照组以及扩增的目的片段作为阳性对照组。酶切验证:以目的片段的双酶切组作为阳性对照,以空载的双酶切组作为阴性对照,将反应后样品进行1%琼脂糖凝胶电泳。:在插入片段正反向扩增引物的5’端引入线性化载体两末端同源序列,使扩增后的插入片段5'和3'最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应一致的同源序列(15-20 bp,不包括酶切位点)。原创 2023-07-27 18:06:55 · 1677 阅读 · 1 评论 -
酵母表达载体介绍
胞内表达的载体主要有:pHIL- D2,pA0815,pPIC3K,pPICZ,pHWO10,pGAPZ, pGAPZa等。(GAP)基因启动子是组成型表达的,不存在诱导的问题,可以在以葡萄糖为碳源的培养基上表达。(GAP)基因启动子是组成型表达的,不存在诱导的问题,可以在以葡萄糖为碳源的培养基上表达。穿梭型表达载体,能够在大肠杆菌和酵母中进行遗传复制。是以毕赤酵母中磷酸甘油酸脱氢酶。穿梭型表达载体,能够在大肠杆菌和酵母中进行遗传复制。分泌型表达载体主要有pPIC9,pPIC9k,pHIL-S1,pPI。原创 2023-07-13 15:07:18 · 388 阅读 · 1 评论 -
重组蛋白四种表达体系分析
包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。2.表达的蛋白质经常是不溶的,形成包涵体。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。原创 2023-08-14 14:19:30 · 203 阅读 · 0 评论 -
原核表达载体-蛋白表达-卡梅德生物
在重组蛋白原核表达系统中,选择合适的载体是至关重要的,因为它直接影响到目的蛋白的表达水平、可溶性以及纯化难易程度。原创 2023-12-26 09:09:53 · 201 阅读 · 0 评论 -
蛋白表达|昆虫蛋白表达--卡梅德生物
本文将介绍昆虫蛋白表达的基本原理、系统及其与其他表达系统的比较。原创 2023-12-20 13:48:06 · 546 阅读 · 0 评论 -
蛋白表达|酵母蛋白表达-卡梅德生物
本文将深入探讨酵母蛋白表达的基本原理、表达系统以及相关载体的特点。原创 2023-12-21 15:06:50 · 122 阅读 · 0 评论 -
真核蛋白表达|蛋白表达-卡梅德生物
卡梅德的小编辑带来关于蛋白表达之真核蛋白表达技术的介绍原创 2023-12-29 09:15:00 · 404 阅读 · 0 评论 -
蛋白表达——卡梅德生物
蛋白表达是生物学研究中一项关键技术,为科学家们揭示生物体内复杂生命过程提供了有力工具。原创 2023-12-18 11:37:03 · 292 阅读 · 1 评论 -
重组蛋白表达纯化--卡梅德生物
卡梅德的小编辑额介绍重组蛋白表达纯化,重组蛋白表达纯化技术是生物技术领域中的关键步骤,旨在高效表达外源蛋白并纯化其产物,以满足科研和生产的需要。原创 2023-12-27 09:30:00 · 46 阅读 · 0 评论 -
重组蛋白表达系统的比较-卡梅德生物
重组蛋白表达是什么? 表达体系如何选择?原创 2023-12-25 13:40:09 · 223 阅读 · 0 评论 -
哺乳动物蛋白表达-卡梅德生物
蛋白表达之哺乳动物蛋白表达,本文是有关哺乳动物蛋白表达的基本原理、系统、载体以及优劣势的综述原创 2023-12-25 13:34:52 · 61 阅读 · 0 评论 -
原核蛋白表达——卡梅德生物
本文将介绍原核蛋白表达的基本原理、常用的表达系统和载体,以及与真核蛋白表达系统的对比。原创 2023-12-19 14:48:56 · 242 阅读 · 0 评论 -
重组蛋白表达的几种形式
揭示生命活动可以从基因、蛋白等不同层面进行探究,随着科学技术的不断发展,对于蛋白的研究,从蛋白提取发展到了重组蛋白表达,目前我们可以借助多种重组蛋白表达系统(原核表达系统、酵母表达系统、昆虫表达系统、哺乳表达系统、植物表达系统)来对我们的目的蛋白进行重组表达和分离纯化,进一步探究蛋白的功能,为科学研究提供了便捷的方法[1]。由于只有少数的蛋白可以进行分泌表达,大多数蛋白以胞内表达为主,所以要想让蛋白以可溶性的形式表达,可以通过融合表达、包涵体复性以及降低蛋白表达速度的方式进行。这篇文章可供科研爱好者参考。原创 2023-10-28 15:36:16 · 163 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】哺乳动物细胞蛋白如何表达?
在哺乳动物细胞蛋白表达领域,构建高效表达载体、选择合适的受体细胞和导入外源基因的方法是至关重要的。构建高效表达载体的关键在于选择合适的启动子、引导序列和选择标记,确保这些元件的协同作用能够在受体细胞中实现高效的蛋白表达。在面对挑战的同时,通过技术创新和系统优化,我们有望更好地发挥这一表达系统的潜力,推动生物医学领域的创新与进步。原创 2024-01-12 15:49:28 · 471 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】蛋白表达-原核表达系统
原核表达系统相对较简单,但在生物学中起着重要的作用。大肠杆菌表达系统是应用最广泛的原核蛋白表达系统之一。原创 2024-01-05 14:13:28 · 895 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】蛋白表达之酵母表达载体
首先,酵母细胞是一种真核细胞,与人类细胞相似,因此酵母表达系统可以用于生产与人类相关的蛋白质,酵母载体是指将外源基因表达于酵母细胞中的一种工具。原创 2024-01-08 14:17:31 · 449 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】蛋白表达:关于酵母载体的介绍
酵母载体主要包括酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)和毕赤酵母(Pichia pastoris)等两大类,酵母表达系统主要是依据基因定位及实验目的,选择合适的表达载体。原创 2024-01-08 14:24:10 · 660 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】蛋白表达-原核表达载体的元件及方式
选择合适的表达载体,对于成功的表达目的蛋白至关重要,我们应结合目的基因的特点,对于蛋白的下游应用等,综合评估哪种载体进行重组蛋白的表达和方案设计。原创 2024-01-06 11:27:43 · 865 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】几种蛋白表达系统的比较
本文将从蛋白表达的背景入手,探讨目前常用的几种蛋白表达系统,并进行简要比较,以帮助我们更好地选择适用于不同需求的表达系统。大肠杆菌表达系统:大肠杆菌表达系统是最常用的原核表达系统之一,具有高表达水平和简单的操作特点。枯草芽孢杆菌表达系统:枯草芽孢杆菌系统同样是原核表达系统,对一些大型、复杂蛋白质的表达效果较好,且易于操作。然而,相较于大肠杆菌,枯草芽孢杆菌的表达水平一般较低。酿酒酵母表达系统:酿酒酵母表达系统属于真核表达系统,适用于一些较大、复杂蛋白质的表达,同时能够实现一些真核细胞特有的后期修饰。原创 2024-01-11 13:36:04 · 1147 阅读 · 0 评论 -
【蛋白表达】原核表达载体-卡梅德生物
大肠杆菌表达系统主要包括:宿主菌(即大肠杆菌)及表达载体。表达载体是在克隆载体的基础上,增加一些表达元件。原创 2024-01-06 11:22:04 · 455 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】重组蛋白表达|重组蛋白表达的原理及应用
通过整合多样的表达系统和技术进展,研究人员能够高效地生产和纯化复杂的蛋白质,推动了科学研究的前进和医学领域的进步。随着技术的不断发展,重组蛋白表达服务将继续发挥重要作用,为解决全球健康问题、药物创新和疾病控制提供关键支持,推动科学研究和医学领域的不断突破。重组蛋白表达服务可以用于生成疫苗中的抗原蛋白,为疫苗的开发和生产提供了关键的支持。原创 2024-01-15 14:31:08 · 397 阅读 · 0 评论 -
哺乳动物表达载体有哪些类型?-卡梅德生物
人工染色体,如细菌人工染色体(BACs)或酵母人工染色体(YACs),是一种大的DNA构建体,可以携带大的能够携带大DNA插入物(100300kb),可容纳基因组片段或基因簇,包括整个基因及其调控元件,并可用于研究哺乳动物细胞中的基因调控、基因组组织和基因功能。基因靶向载体用于哺乳动物细胞中的基因编辑和基因敲除研究。每种载体类型都有其优点和局限性,哺乳动物表达载体选择应根据其特定的实验要求仔细选择合适的载体,载体的选择取决于各种因素,包括基因的长度和复杂性、所需的表达持续时间、调节的需要和下游应用。原创 2024-03-26 17:05:07 · 302 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】哺乳动物细胞表达系统介绍
多腺苷酸化信号,也称为polyA信号或polyA尾,是在转录过程中添加到信使核糖核酸3'端的腺嘌呤核苷酸序列,发出转录终止和多聚(C)尾添加到mRNA转录物中的信号,在信使核糖核酸的稳定性、从细胞核输出和翻译效率方面起着关键作用,哺乳动物细胞表达载体通常包含基因下游的polyA信号,以确保适当的mRNA处理和稳定性。因此,它们通常包含细菌生长的选择性标记,例如抗生素抗性基因(例如,氨苄青霉素或卡那霉素抗性基因),能够在细菌培养中的克隆和质粒扩增步骤中选择携带表达载体的菌落。原创 2024-03-26 17:02:31 · 390 阅读 · 0 评论 -
【卡梅德生物】哺乳动物表达常用的细胞系简介
每种哺乳动物细胞系都提供了适合不同应用的特定优势和特性,哺乳动物细胞的选择取决于各种因素,如所表达蛋白质的性质、所需的翻译后修饰和预期的下游应用。原创 2024-03-28 15:15:22 · 445 阅读 · 0 评论 -
卡梅德生物|重组蛋白表达概述
随着科技的进步以及卡梅德生物专业的技术团队的方案优化,目前可以针对一些难表达或者产量低的蛋白从基因层面进行优化和改进,以提高蛋白质表达的效率和功能性。哺乳动物细胞表达系统,如CHO和HEK293细胞,能够进行复杂的糖基化和正确的蛋白质折叠,这使得它们成为生产功能性疗效蛋白质(如抗体)的首选系统。然而,大肠杆菌表达系统的一个主要限制是其无法进行复杂的后转录修饰,如糖基化,这对某些蛋白的功能至关重要。昆虫细胞系统,特别是使用杆状病毒载体的Sf9细胞,是另一种能够进行必要的翻译后修饰的表达系统。原创 2024-05-24 13:37:31 · 168 阅读 · 0 评论 -
昆虫杆状病毒表达系统-卡梅德生物
这些细胞系,如Sf9和Sf21,由于其高转染效率和支持强大病毒复制的能力,通常用于蛋白表达:如昆虫sf9细胞表达、昆虫sf21细胞表达。杆状病毒可以有效地感染昆虫细胞并在其中复制,从而导致高水平的蛋白质表达。昆虫杆状病毒表达系统,是一种广泛用于昆虫杆状病毒蛋白表达的系统,涉及使用杆状病毒,这是一种昆虫特异性病毒,在昆虫细胞中传递和表达外源基因。8. 蛋白质复合物和多聚体蛋白质:昆虫杆状病毒表达系统适用于生产蛋白质复合物或多聚体蛋白,允许多个亚基的共表达或融合蛋白的产生,促进生物相关复合物的产生。原创 2024-03-28 15:13:45 · 401 阅读 · 0 评论 -
重组蛋白表达系统优缺点对比|卡梅德生物
重组蛋白是现代生物技术中不可或缺的一部分,它们广泛应用于药物开发、研究工具和工业酶的生产。根据目标蛋白的特性和所需的修饰,可以选择不同的表达系统。原创 2024-05-24 13:42:28 · 661 阅读 · 0 评论