双酶交联透明质酸水凝胶负载BMSC骨髓间充质干细胞/透明质酸水凝胶负载BMSCs/BMP-2

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以明胶为主材料，选择羟基苯丙酸(Hydroxybenzenepropanoicacid，HPA)对明胶材料进行接枝改性，制备GH高分子(Gelatin-hydroxyphenyl)复合材料。采用双酶(HRP/ChOx)催化GH上的苯酚基团发生共价交联，制备GH水凝胶，并对其理化性质进行一系列检测，调整ChOx酶活力水平优化水凝胶机械强度，制得适合离体细胞三维培养及生物相容性良好的GH水凝胶。通过GH水凝胶体外三维培养BMSCs，检测其对BMSCs神经分化及神经营养因子分泌的作用;

制备方法：GH水凝胶的优化制备及其相关性能表征，溶剂选用体积比为2∶3的DMF和H2O混合液，通过EDC/NHS偶联反应制备GH复合材料。通过核磁共振氢谱法(1HNMR)和紫外可见分光光度计法分别定性和定量地检测HPA的接枝效率;通过HRP/ChOx(HRP=1U/mL;ChOx=0.25，0.5，1U/mL)双酶体系制备可注射GH水凝胶;使用扫描电子显微镜（scanningelectronmicroscope，SEM）观测分析GH水凝胶的内部微观结构;制备HRP1UChOx0.25U，HRP1UChOx0.5U，HRP1UChOx1U三组GH水凝胶，应用倒置试管检测法测定三组GH水凝胶的凝胶时间;

采用冷冻干燥方法检测三组GH水凝胶的含水率;分析天平称重法测定三组GH水凝胶在胶原酶专一酶解下的生物降解性;使用旋转流变仪测定三组GH水凝胶的机械性能。

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