纳米金偶联抗体/蛋白试剂盒（20nm，1mg/100μg/500 μg偶联量）的制备

纳米金偶联抗体/蛋白试剂盒可以通过抗体/蛋白上的伯胺基团（如赖氨酸），简单、快速地实现抗体/蛋白与纳米金的共价偶联。偶联在30分钟内即可完成，偶联效率可达70%左右。此为通用型试剂盒，适用于各种分子量的抗体/蛋白，也适用于多肽、酶等分子。下面小编给大家分享了纳米金偶联抗体/蛋白试剂盒（20nm，1mg/100μg/500μg偶联量）的储存与步骤，和小编一起来看！
试剂盒组成与存储

将试剂盒储存在-20⁰C。偶联剂、反应缓冲液可保存在+4℃或-20℃

实验步骤

Ø 将所有的试剂恢复至室温。

Ø 取500 μL反应缓冲溶液加入1管纳米金中，得到纳米金的分散液；取1管偶联试剂溶解于200 μL纯水中。

Ø 取100 μg抗体/蛋白加入至上一步的纳米金缓冲溶液中，在该混合溶液中，再加入100 μL偶联试剂，混匀后在室温下持续30分钟左右。（注意：偶联试剂需现配现用！）

Ø 反应结束后以9500 rpm，离心20分钟，纯水洗涤2~3次以除去未反应完的抗体/蛋白。

Ø 共轭抗体储存：标记抗体/蛋白后，我们建议将偶联物储存在 +4°C，不要将偶联物储存在 -20°C。偶联物的整体稳定性将由抗体/蛋白本身的稳定性决定，因为它会首先降解。如果您的抗体/蛋白稳定，偶联物也将稳定。

Ø 测量偶联物浓度：纳米金(20nm)的最大吸光度(Absmax)为528 nm。为了确定纳米金偶联物的有效浓度，我们建议在将样品稀释到适合您的设备的适当范围后，使用紫外-可见分光光度计测量 Absmax。

注意事项

Ø 本试剂盒可以兼容无胺缓冲液（PBS, MES, MOPS, HEPES）和 < 50%甘油。若样品抗体/蛋白中存在以下成分，可能会干扰样品抗体/蛋白与纳米金的偶联。

缓冲液组成是否兼容无胺缓冲液（如：PBS, MES, MOPS, HEPES）是 (pH 6.5-8.5)甘油是 (＜ 50%)Gelatin (明胶)否Tris否甘氨酸否羧酸分子(EDTA、柠檬酸等)否含伯胺基或巯基分子 (氨基酸、乙醇胺、巯基乙醇或DTT等)否血清蛋白否。

Ø 若存在以上干扰成分，可先通过超滤管或透析等方式除去干扰成分，再使用本试剂盒将抗体/蛋白与纳米金偶联。

Ø 最佳偶联抗体/蛋白量：偶联抗体/蛋白量将影响每个纳米金粒子表面的抗体/蛋白分子数量，最佳偶联抗体/蛋白量取决于您的应用需求。因此，您可能需要偶联不同数量的抗体/蛋白，结合应用测试优化得到最佳偶联抗体/蛋白量。

瑞禧YWX.2022.7.28