荧光/菁染料CY3、CY5、CY7标记叶酸是一种生物化学标记技术,通过将这些荧光染料与叶酸结合,实现对叶酸的追踪和观察。以下是关于这种标记技术的详细解释:
一、荧光/菁染料概述
- CY3:一种吲哚菁染料,具有强烈的荧光信号和较长的激发和发射波长。它能够通过π-π*跃迁产生荧光,通常用于细胞和分子生物学研究中的荧光标记。
- CY5:另一种长波长荧光染料,激发和发射波长更长,适用于需要更高组织透过性和更低背景荧光干扰的场合。
- CY7:同样是一种长波长荧光染料,具有与CY5类似的性质,但仍具有荧光性能。
二、标记原理
- 荧光素与叶酸的结合:通过化学反应,将荧光染料(CY3、CY5、CY7)与叶酸分子中的特定官能团(如羟基、羧基等)进行偶联,形成稳定的共轭连接。这种连接确保荧光染料在生理条件下与叶酸保持稳定。
三、标记过程
- 准备荧光素溶液:将荧光染料(CY3、CY5、CY7)溶解在适当的溶剂中(如DMSO、DCM等),制备适当浓度的荧光素溶液。
- 准备叶酸溶液:将叶酸溶解在适当的缓冲液中(如磷酸缓冲液,pH 7.4),制备适当浓度的叶酸溶液。
- 进行标记反应:在适当的条件下(如室温、4摄氏度等),将荧光素溶液加入到叶酸溶液中,使荧光素与叶酸分子中的特定官能团发生化学反应。反应时间可以根据具体情况进行调整。
- 纯化:通过适当的纯化步骤(如透析、离心、色谱分离等),去除未反应的试剂和副产物,得到纯净的荧光标记叶酸。
四、技术特点
- 高荧光性:荧光染料CY3、CY5、CY7均具有强荧光性,可以在低浓度下产生明显的荧光信号。
- 低背景干扰:对于CY5和CY7等长波长荧光染料,它们在生物体内具有较低的背景荧光干扰,提高了成像质量。
其他:
Rhodamine B-叶酸 Rhodamine B-FA 罗丹明B标记叶酸 罗丹明B修饰叶酸
Ce6-叶酸 Ce6-FA 二氢卟吩标记叶酸 Ce6光敏剂修饰叶酸
Comarin-叶酸 Comarin-FA 香豆素修饰叶酸 荧光标记叶酸
Bodipy-叶酸 Bodipy-FA 氟硼二吡咯标记叶酸
叶酸-NHS FA-NHS 活化脂修饰叶酸 NHS-叶酸 N-羟基琥珀酰亚胺-叶酸 N-羟基琥珀酰亚胺改性叶酸
叶酸-MAL FA-MAL 马来酰亚胺修饰叶酸 叶酸-Maleimide 马来酰亚胺改性叶酸
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