论文阅读1——High-resolution quantitative phase-contrast microscopy by digital holography

## Experimental
使用如图所示装置进行实验。在基于马赫-曾德尔结构的干涉仪中，将空间滤波和准直的激光输出分为参考光束和目标光束。安装在$xyz$平移台上的物体标本被放置在离全息图平面H的距离z处，其放大的图像和参考光束被投射到CCD摄像机上。使用一对类似的显微镜物镜，20X，0.4NA或40x，0.65NA，取决于所需的横向放大率，以匹配两个波前的曲率。在离轴全息中，通过倾斜分束器BS2，在物体和参考光束之间引入了一个小角度。相机(索尼DFW-V 500)有一个640 x 480像素阵列在4.7x3.6mm2的活动区，8位灰阶输出。数字延迟发生器(StanfordResearchdg 535)以20 Hz的重复频率触发激光和照相机。电缆将摄像机连接到计算机，计算机处理所获取的图像，并使用基于LabVIEW和MATLAB的多个程序计算全息衍射。

计算全息衍射有许多可用的数值方法。最常用的方法是菲涅耳变换[1]，其中球面惠更斯小波对抛物面的近似允许用单傅里叶变换计算衍射积分。在卷积法中，利用三个傅里叶变换，利用卷积定理[2]，在不进行这种近似的情况下计算衍射积分。另一方面，角谱法涉及两个傅里叶变换[3]，加上角谱的简单滤波。如图所示，我们已经将这三种方法都用于重建分辨率目标的图像。使用$452 \times 452$像素对包含第7组元素6的美国空军分辨率目标的$ 25 \times 25um^2$区域进行成像。图(a)是由CCD摄像机记录的全息干涉图，其傅里叶变换在图(b)中是角谱。它包含三个主要的峰，它们对应于零阶和双像的光谱。其中一个峰-突出的矩形面积-被选择，一个传播相位因子($z=7um$)被乘以，最后反傅里叶变换，以获得图(c)中的振幅图像和图(d)中的相位图像。单个棒宽为$2.2um$，分辨率较高，与$0.65NA$透镜的衍射极限分辨率$0.5um$一致。该分辨率目标是透明玻璃板上带有不透明铬膜图案的正掩模，用于传输。从相图分析可知，金属带材的相位阶跃为52°。给出了薄膜的物理厚度$d=\lambda (\Delta \psi / 2\pi)(n-n_0)$，式中$\Delta \psi$为相位步进，$(n-n_0)$胶片与空气的折射差。用已知的$50nm$膜厚估算，金属膜的光学指数(实部)为2.5。平面面积的噪声级为10°，对应于$30nm$的玻璃厚度变化。(在镀膜棒区，光线的缺乏会导致相位的较大不确定性。)相位图图(i)是用伪彩色的三维透视图呈现的。在相图中特别值得注意的是，在振幅图像中缺乏明显的相干噪声，在大多数其他全息成像方法中也很普遍。惠更斯卷积法得到的振幅和相位图像如图(e)和(f)所示，以及从图(g)和(h)中的菲涅耳法得到的。这些图像明显退化的主要原因是离轴角度不足，无法分离出零级分量。这种影响在菲涅尔图像中是最有害的，部分全息图像被掩埋在零级背景中，其相位图像被完全置乱。这种影响表现为卷积图像中的杂散干扰图案。虽然为了避免菲涅耳法或卷积法中的零级入侵，必须严格满足最小离轴角，但角谱法对零级分量的控制和去除是简单而灵活的。另一个潜在的问题是菲涅耳法和卷积法需要最小的全息图距离来避免混叠，而角谱法没有这样的最小值，甚至可以在零距离处计算图像。最小距离为$Z_{min}=a^2/N\lambda$，a是全息图的大小，N是象素的数目。对于这里所示的特定示例，最小距离恰好是2.6μm，因此不是一个问题。

[1]E. Cuche, F. Bevilacqua, and C. Depeursinge, “Digital holography for quantitative phase-contrast imaging,” Opt. Lett. 24, 291-3 (1999).

[2]I. Yamaguchi, J. Kato, S. Ohta, and J. Mizuno, “Image formation in phase-shifting digital holography and applications to microscopy,” Appl. Opt. 40, 6177-86 (2001)

[3]Lingfeng Yu and Myung K Kim, “Wavelength-scanning digital interference holography for tomographic 3D imaging using the angular spectrum method,” Opt. Lett. 30, 2092 (2005).