在利用明场或荧光显微镜成像时,往往会由于样品厚度不一、镜头污渍或者光照不均等因素,降低图片质量,从而影响分析以及展示。
这篇文章就为大家介绍:怎样利用 ImageJ 对图片进行背景校正,包括两个方面:白平衡以及平场校正。
一、白平衡
白平衡(White Balance),在数码摄影中常常会遇到,在拍摄显微镜的明场图片时,更是值得关注的一点。
白色通常是指反射到人眼中的光线由于蓝、绿、红三种色光比例相同,且具有一定的亮度所形成的视觉反应。
对应在 RGB 彩色图片上,即 RGB 图片的三个通道(Red, Green, Blue)的灰度值大小相近。下图这个立方体很好地解释了 RGB 色彩模式,当 R,G,B 三个通道的灰度值都为 255 时,呈白色:
![c3139e34233606f8d9b0a20042ceba05.png](https://i-blog.csdnimg.cn/blog_migrate/8d06feb96068aa84cfb9356ac92cc0ed.png)
但在实际利用显微镜拍照的过程中(例如对细胞进行明场拍照),因为培养基本身的颜色等因素的影响,拍摄的照片往往不显白色,有不同颜色的偏向,即 RGB 三个通道的灰度值差别很大。
如下图,是利用倒置像差显微镜拍摄的细胞,图片整体偏黄。
![50fba99ac95630471b4b1218add4e8dd.png](https://i-blog.csdnimg.cn/blog_migrate/79127b8ee63f4866cdb529260270054a.jpeg)
1. 将 RGB 图片变成三种颜色通道的 Stack(Image -> Color -> Make Composite)。
这一步将 RGB 图像分解成 R, G, B 三个通道的堆栈(Stack),每个通道为 8-bit 图像。但这时并不能看到单色的图片。
点击图片阅读全文☺教你十分钟校正图片背景,结果图再也不怕被吐槽了!
其他研友正在关注如何分析和展示 RNAseq 基因表达数据中基因的相关性?
初学者如何利用 EndNote 写标书研究背景与现状?
细胞培养最常遇到的问题都在这了 | 实验
没有师兄疼,没有师姐爱,我的实验该怎么办?
一招搞定启动子序列查找
零基础菜鸟:如何快速写出高质量的 SCI 论文题目和摘要
热门实验 (点击关键词进入) 为你解决实验难题ChIP | PCR | RT-RCR | ELISA免疫共沉淀 | 细胞冻存与复苏 细胞凋亡检测 | 总 RNA 提取实验 大肠杆菌转化 | P13K/Akt/mTOR信号通路
![bc47a5eb46528cf8b466bf650c4596c6.png](https://i-blog.csdnimg.cn/blog_migrate/4dff108bcbac41d7c336df5f004baea9.jpeg)