受温度的影响小;
④缓冲液稀释后
pH
变化小,如稀释十倍后
pH
的变化小于
0.1
。
其缺点为:①易与常见的钙
Ca++
离子、镁
Mg++
离子以及重金属离子缔合生成沉淀;②会抑制某些生物
化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。
⑵
Tris
(三羟甲基氨基甲烷,
N-Tris(hydroxymethyl)aminomethane
)缓冲液
Tris
缓冲液在生物化学研究中使用的越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势,如在
SDS-
聚丙烯酰胺凝胶电
泳中已都使用
Tris
缓冲液,而很少再用磷酸盐。
Tris
缓冲液的常用有效
pH
范围是在
“
中性
”
范围,例如:
Tris-HCl
缓冲液:
pH
=
7.5
~
8.5
Tris-
磷酸盐缓冲液:
pH
=
5.0
~
9.0
配制常用的缓冲液的方法有两种:
①按一般书后附录中所列该缓冲液表中的方法,
分别配制
0.05mol/L Tris
和
0.05mol/L
HCl
溶液,然后按表中所列体积混合。由于标准浓度的稀盐酸不易配制,所以常用另一种方
法;②若配
1L
0.1mol/L
的
Tris-HCl
缓冲液:先称
12.11g
Tris
碱溶于
950mL
~
970mL
无离子水中,边搅
拌边滴加
4N HCl
,用
pH
计测定溶液
pH
值至所需的
pH
值,然后再加水补足到
1L
。
Tris-HCl
缓冲液的优点是:
①因为
Tris
碱的碱性较强,
所以可以只用这一种缓冲体系配制
pH
范围由酸性到碱性的大范围
pH
值的缓冲
液;②对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。