你在实验过程中是不是也经常会遇到这个问题:标曲的相关系数达不到“4个9”,甚至根本不成线性。根本原因是的标准曲线做的不规范,那么,什么是规范的标准曲线自作方法呢?
在学习制作标准曲线此之前,我们要了解一个重要前提,那就是:制作标准曲线的要求是什么?只有知道要求,我们才能按照要求制作出合格的标准曲线。
制作要求
按GB/T22554-2010《基于标准样品的线性校准》推荐:
1、标准曲线的浓度范围应覆盖正常操作条件下的被测量范围;
2、标准样品的组分尽量与被测样品组分一致;
3、标准样品的浓度值应等距离的分布在被测量范围;
4、标准样品的个数至少应有3个浓度;
5、每个标准点至少重复2次,这个重复是指从稀释开始;
如果国家标准有相应的浓度系列推荐,尽量按国家标准,如果你要偷懒,比如我要减少标准点,至少要有理论标准支撑,比如至少要3个浓度。工作中我们经常采用线性校准,因为线性方程最为简洁。
制作方法
1.标准液浓度的选择:
在制备标准曲线时,标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值,一般可选择5种浓度。浓度差距最好是成倍增加或等级增加,并应与被测液同样条件下显色测定。
2.标准液的测定:
在比色时,读取光密度至少读2-3次,求其平均值,以减少仪器不稳定而产生的误差。
3.标准曲线图的绘制:
一般常用的是光密度--浓度标准曲线。
①用普通方格纸作图。图纸最好是正方形(长:宽=l:1)或长方形(长: