
配方一
底物显色A液:醋酸钠13.6g,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml。
底物显色B液:乙二胺四乙酸二钠0.2g,柠檬酸0.95g,甘油 50ml,TMB 0.15g,蒸馏水加至500ml。如果是普通的TMB,而非盐酸盐,要先用DMSO溶解后再加入水中。
使用前A B 液 1:1混合即可。
配方二
TMB母液:用DMSO将TMB配成1%浓度,4°C保存。
TMB工作液:在pH5.0柠檬酸缓冲液9.9ml中加入0.1ml 1%TMB液。
PH5.0柠檬酸缓冲液配方:0.1mol/L柠檬酸24.3ml,0.2mol/L Na2HPO4 25.7ml,H2O 50ml
配方三
底物缓冲液( pH5.0的磷酸-柠檬酸缓冲液),配制方法为:
0.1mol/L柠檬酸C6H8O7•H2O),即称取柠檬酸19.2g,加水至1000mL,为甲液;
0.2mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4),即称取磷酸氢二钠71.7g,加水至1000mL,为乙液;
取甲液24.3mL,乙液25.7mL,加水至100mL,即为底物缓冲液
底物溶液:取50UL TMB(10mg TMB溶于1mL DMSO中)溶液+10mL底物缓冲液+10μL30%过氧化氢,混匀。
配方四
称取TMB17.2mg(固体),加DMSO1ml 溶解 ,然后加醋酸钠缓冲液(0.1mol/l,pH5.5)66 ml,此为底物A
底物B ,取双蒸水100ml,加30%H2O2 17微升
使用时A:B 液等体积混匀即可.
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