在学习单光子共聚焦显微镜操作过程中发现网络资源较少,课堂学习后梳理整此文档以供自己他日复习,也分享给需要的朋友(以一次实验操作为例)。
(图片来源:华南理工大学公共设备共享平台)
一、实验目的:了解并熟悉单光子共聚焦显微镜的原理与操作。
二、实验仪器:
名称:单光子共聚焦显微镜
生产厂家:日本NIKON
三、样品制备:
老师准备的细胞爬片一张。
四、实验操作步骤:
①检查仪器情况,确认无误后关闭实验室内的日光灯,保持暗室环境。②按照次序,依次打开电动载物台控制器、卤素灯、汞灯、显微镜、激光光源、共聚焦控制器、电脑,确认各部件运行良好。③将细胞爬片置入显微镜载物台上,选择合适的物镜,先在空气介质下由低倍到高倍选择合适视野,最后用*60的油镜进行观察。④打开荧光开关,将显微控制器调整到“FLI”、“in”的状态,选择(DAPI\EGFP),调整合适的荧光强度确定观察视野。⑤关闭荧光开关,打开电脑软件,勾选要进行拍摄的DAPI、EGFP、Cy