多维多重背包问题_多维液相色谱解决中药的复杂问题

中药是复杂的体系, 通常一个样品中包含了几十甚至几百种组分,而各组分之间的量差别通常又很大。因此, 如何更好地解决单柱、单检测器色谱分析方法的局限性迫在眉睫。多维液相色谱(MDLC)是在高效液相色谱(HPLC)基础上发展起来的一项技术, 它通过在技术上及设备上的改进, 组合不同的分离模式构建多维系统, 为中药成分分析提供了较好的分辨率,有效地解决了复杂体系样品的分析问题。目前, MDLC已在中药化学、聚合物分析、生命科学、环境科学等诸多领域有着广泛的应用。

1．MDLC 的原理

MDLC利用两个或更多的色谱柱对复杂样品中的待分析组分进行分离, 在柱与柱之间利用切换阀将经过初次分离的全部或部分组分选择性地转入另一根或多根不同类型的色谱柱中做进一步分离。MDLC 具有对样品进行分离富集的功能, 可显示提高色谱系统的分离能力和选择性, 缩短分析时间;并且能从复杂的多种组分中排除干扰物质, 再选择性地针对感兴趣的组分进行分析。

2．MDLC 的分类

从不同角度, MDLC 可以有不同的分类。根据对进样样品中完成分析的组分数量可以把MDLC 分为部分模式和整体模式。部分模式是指将第一维洗脱流分中感兴趣的部分注入后继续进行分离, 即中心切割法。很明显,中心切割法并不能得到样品的全部组分信息，不利于对未知样品组分进行操作。另一方面, 为了判断感兴趣组分的切割时机，还需要在各个分离模式下测量单一组分标准品的保留时间, 增大了工作量。整体模式即全多维液相色谱, 是对注入第一维色谱柱的全部样品或者是能够代表所有组分的部分样品进行后续的分离。因此,全多维液相色谱能得到全部组分的保留信息，可以对复杂体系中的未知样品进行分析。

MDLC还可以根据对一维洗脱流分进行后续分离的连续性分为离线操作和在线操作。离线操作是将前一根色谱柱分离的流分依次收集起来, 然后再分别注入第二根色谱柱进行分离。在线操作是将第一维洗脱流分中感兴趣的部分直接切换注入后续柱上, 或者是利用收集切换装置交替地收集适量的第一维流分, 并按照特定时间间隔进行后续柱分离, 使样品在第一维与最后维的分离几乎同时结束。显而易见, 与离线操作相比, 在线操作具有分辨率高, 无样品损失,快速, 易于实现自动化等优点。

3. MDLC在中药研究中的应用

同一维液相色谱系统相比, MDLC主要的优势在于提供了不同寻常的峰容量, 这使得大多数目标化合物和化合物组可基线分离。同时, 组分峰多维分离空间中被多重定位, 减少了干扰, 定性可靠。另外, 相对于同族的其他成员来说,每个峰在每次运动中其位置是稳定的, 容易识别。因此,MDLC 已经广泛地应用于中药这种包含了从无机到有机,从极性到非极性复杂体系的分析研究中。例如，采用二维液相色谱- 质谱联用方法分离中药复方葛根芩连汤的成分。以CN柱作第一维色谱柱, 水和甲醇梯度洗脱分离；以C₁₈ 柱作第二维色谱柱,乙酸铵缓冲液和乙腈梯度洗脱分离；电喷雾电离/ 大气压化学电离( ESI/ APCI) 作为质谱检测复合离子源。结果，搭建的二维液相色谱的峰容量显著高于一维色谱, 分离效果得到了明显的提高。

MDLC已经在成分复杂的中药研究中发挥了重要作用。相信随着色谱填料的改进以及色谱仪器技术的进步,MDLC 在动态分析范围、分离能力、分析通量和检测灵敏度等方面还会有更大的发展, 为解决复杂中药分析体系的一些关键问题发挥不可替代的作用。

      供稿：孔令钰

图文编辑：胡志洁

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