hiv实验室抗体筛查流程图_检验科的困扰HIV抗体筛查假阳性

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作者:陈克宾

单位:高唐县人民医院

一、前言:

获得性免疫缺陷综合征(AIDS),即艾滋病,是一种危害性极大的传染病,由感染人免疫缺陷病毒(HIV病毒)引起。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的CD4 T淋巴细胞作为主要攻击目标,大量破坏该细胞,使人体丧失免疫功能。HIV在人体内的潜伏期平均为8~9年,患艾滋病以前,可以没有任何症状地生活和工作多年。早期发现、早期预防、隔离是阻止HIV传播的有效手段。为了能够早期的诊断HIV感染,筛查试验极为重要。但是现有的筛查技术,依然难以避免假阳性的结果出现,这也给实验室工作带了诸多的不便,也给临床带来了困扰[1]。

二、案例概述:

案例一:该病例为一名86岁男性患者,12月2日因上消化道出血来我院就诊,由于是中午值班时间我院急查感染四项用的是四联卡胶体金法和单独HIV金标卡,两种试剂都显示该患者HIV两条红线结果为阳性反应。如下:

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下午上班后将该病号标本送至HIV筛查实验室,用HISCL化学发光法复查结果为0.0COI阴性反应。结果如下:

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因为存在两种金标方法的阳性反应,想要验证是否真阳性样本,次日将该标本送至上级单位做确证试验,几日后反馈结果为阴性。结果如下:

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案例二:该病例为一名82岁女性患者,因颅内出血在我院神经外科住院术前查感染四项,用酶免试剂检测,其中HIV抗体阳性反应。

如下:

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当天下午用胶体金法和HISCL化学发光法复查,胶体金法和化学发光法结果均为阴性。结果如下:

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出于谨慎的操作处理,因存在酶联免疫方法的阳性反应,次日还是将该标本送至上级单位做了确证试验,反馈结果也为阴性。

如下:

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三、HIV抗体假阳性的因素分析:

以上两个案例分析,有一个共同的特点,两名患者都为老年人,因此猜测可能由于体内的某些异嗜性干扰物质引起。文献报道引起抗体筛查的假阳性常见原因有:如恶性肿瘤、心血管疾病、透析、自身免疫性疾病、妊娠等这些疾病可使患者体内含有某些治疗性抗体、类脂嗜异性抗体、类风湿因子、甲胎蛋白等,这些物质会与试剂中的抗原成分非特异结合,从而发生假阳性[2]。

胶体金法引起假阳性的因素:

1.使用艾滋病试纸检测的时候有别的干扰物质混入,可造成出现了假阳性结果。

2.加了过多的血液,或者缓冲液,使得艾滋病试纸太湿润,在检测区形成的一个红印,可能造成看上去是一条假阳性带。

3.有其他疾病,形成的交叉反应,出现假阳性。

4.长期的服用一些药品,改变了人体的某些物质,在用艾滋病试纸测的时候出

现假阳性,在停药后一个月左右复查可以恢复正常。

5.检测产品的问题出现假阳性,这种机率是非常低的,在出厂之前都做过了严格详细的测试。 6.使用金标法进行抗-HIV检测目前还不够成熟,其特异性与灵敏度不高 [3]。

酶免法引起假阳性的因素:

1.吸针清洗不干净容易引起携带污染。 2.若标本为脂血进行检测前要吸出一部分上层混悬液与氯仿混合后,用力混匀静置后在离心检测。 3.洗板机用久后,其机械运程易出现位移偏差,造成微孔内液体吸不干净;

在临床工作中由于标本数量不定,不一定是整板检测,有时会拆散微孔板条重新安装在支架上,若安装不当会造成微孔间底面不在同一水平面上,致使孔间液面不整而吸不干净。

4.更换液体时注意不能将蒸馏水与洗液混用,因为二者PH值不同,洗涤效果完全不同。

四、结论:

ELISA、胶体金法是目前常用的HIV病毒筛选方法。胶体金法操作简单、判断简单,但是特异性比较差,容易出现假性结果.ELISA敏感度和特异性都比较理想,但是操作步骤多耗时长,适合大批量标本。全自动化学发光法,操作简单,随来随检,灵敏度和特异性都比较高,虽然检测成本相较于金标法和ELISA偏高,但是确实是目前比较好的筛查方法。日常工作中出现HIV反应性结果的情况,不要惊慌,任何一种检测都不可能达到100%特异性的,即使化学发光的HIV第四代检测试剂也会出现假阳性。要理性看待这种情况,完善自己实验室复检和送检流程,按照主管部门的规定送检,避免结果的误报。

参考文献:

[1]吴志奇 第三代HIV ELISA诊断试剂初筛试验假阳性原因分析[J]检验医学与临床2015年10月第12卷第19期 Lab Med Clin,October 2015,Vol.12,No.19.

[2]顾春瑜,刘英丽,王海滨,孙婷婷,何丽婧 第四代 HIV 诊断试剂检测 HIV 抗体假阳性原因分析[J].武警医学 2013 年 9 月第 24 卷 第 9 期Med J Chin PAPF, Vol. 24,No. 9,September,2013

[3]高友林,张小红.金标斑点法及酶联免疫试验对HIV患者的临床测定效果对比[J].检验医学与临床,2012,(13):1611-1612.

来源:高唐县人民医院

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