本文介绍了qRT-PCR中CT值的概念，它是荧光信号达到设定阈值时的循环数，与DNA含量成正比。通过2^-ΔCt和2^-ΔΔCt方法，可以分析目的基因的相对表达量，尤其在处理表达差异大的情况下，2^-ΔΔCt法提供更直观的结果。内容涉及PCR扩增原理及在基因表达研究中的应用。
作为基础实验的老客户，小王子不得不说一句公道话：qRT-PCR的结果处理起来真是头大！！！那么，有没有其他比较简便的方法可以供我们使用呢？这里，小王子给大家推荐两种比较常用的计算方法。
一、导出结果里的CT值是什么意思？
欲理解qRT-PCR中的CT值，我们先回顾一下其扩增原理，PCR的扩增，简单来说就是指数增长，也就是1变2，2变4，4变8...与此同时反应管内的荧光信号也逐渐变强，当达到我们设置的阈值时，机器会记录各个反应管内所经历的循环数，这也就引出了我们的CT值：每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 (cycle)。我们用的荧光染料与双链DNA结合后荧光大大增强，所以我们可以理解为荧光强度跟DNA含量成正比。由于到达同一个阈值，我们得出到达阈值时其终产物量一致，所以不难推断出CT值越小，其扩增所需循环数越少，目的基因的模板量越高。
基于第一部分CT值的意义，我们可以对目的基因的相对表达量进行以下推导：
最低0.47元/天 解锁文章
被折叠的 条评论
为什么被折叠?
到【灌水乐园】发言
