Desthiobiotin-PEG1-NHS ester，去硫鸟嘌呤-PEG1-NHS酯

以下是关于 Desthiobiotin-PEG1-NHS ester 的详细信息整理：

化学性质与结构

Desthiobiotin-PEG1-NHS ester 是一种生物素衍生物，结构包含以下关键部分：

• Desthiobiotin: 生物素的类似物，缺失硫原子（thio），与链霉亲和素结合力较弱（可逆结合）。
• PEG1: 含有一个乙二醇单元（PEG spacer），增加水溶性和灵活性。
• NHS ester: 活化基团，可与伯胺（如赖氨酸或蛋白N端）反应形成稳定酰胺键。

结构式：

应用场景

• 可逆亲和纯化: 用于结合链霉亲和素/亲和素树脂，温和洗脱（生物素竞争）。
• 蛋白标记: 修饰抗体、多肽或其他含伯胺的生物分子。
• Pull-down实验: 临时捕获目标蛋白，避免强结合导致的变性。

实验操作要点

溶解与储存

• 溶剂：推荐使用无水DMF或DMSO溶解，避免水溶液长期保存（NHS酯易水解）。
• 储存条件：-20℃干燥避光，分装避免反复冻融。

反应条件

• pH范围：7.5-8.5（磷酸盐或HEPES缓冲液）。
• 温度：4-25℃，避免高温导致NHS酯水解。
• 摩尔比例：通常使用5-10倍过量（相对于目标伯胺）。

注意事项

• 淬灭步骤: 反应后加入 Tris 或甘氨酸淬灭未反应的NHS酯。
• 纯化: 脱盐柱或透析去除未结合小分子。
• 兼容性: 避免还原剂（如DTT）破坏NHS酯活性。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体！
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