2023.7.10蛋白纯化及2023.7.11 ITC

实验通过ITC技术研究5.2mg/ml的525_N_sumo蛋白与不同浓度ASP的相互作用。初步实验发现蛋白与ASP的反应可能为放热,但高浓度ASP可能导致快速饱和。第二批实验尝试降低ASP浓度以获取更精确数据,但出现负峰可能与仪器稳定性有关,需进一步纯化蛋白并优化实验条件。

摘要生成于 C知道 ,由 DeepSeek-R1 满血版支持, 前往体验 >

实验材料

  • ITC仪器
  • 蛋白:525_N_sumo
  • 蛋白浓度:5.2 mg/ml

实验方法及结果

525_N_sumo 镍珠蛋白纯化

在这里插入图片描述

结果

  • 蛋白浓度:5.2mg/ml
  • 沉淀的样跑的时候有一点漏了

第一批 ITC

实验方法

  • 1mM ASP滴定透析buffer
  • 200μM ASP滴定525蛋白

参数

  • 滴定次数:5μl x 10次
  • 滴定间隔:①10s ②15s

结果

  • 1mM ASP滴定透析buffer
    在这里插入图片描述
  • 200μM ASP滴定525蛋白
    在这里插入图片描述

分析

  • 第一次用的是 1mM 的ASP先熟悉一下操作,
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