如果你已经拥有了一台快速PCR仪,那么你就需要一个快速的酶来与之配对;而如果你只有普通的PCR仪,快速的PCR试剂也能让你增速不少。在PCR反应中,延伸阶段的持续时间主要取决于DNA聚合酶的延伸速率,提高聚合酶的活性,就可以缩短延伸步骤所需的时间,乃至整个PCR 反应所需的时间。这也就是说,大家可以通过挑选好的DNA聚合酶来提高pcr的效率。当然,在现在基本流行预混液的年代,挑选高效的DNA聚合酶就和挑选pcr预混液划等号了,那么应该怎么选购一款高效好用的pcr Mix呢?
首先我们先来了解下现行市场的pcr Mix类型:
液体PCR MIX | 冻干PCR MIX |
---|---|
-2℃-4℃温度存储 | 常温运输、常温存储 |
便宜 | 较贵 |
不能反复融冻,直接用于pcr | 使用前需与随附的缓冲液配置后使用 |
类型 | 描述 |
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普通PCR MIX | 常规的Taq酶DNA聚合酶 |
热启动PCR MIX | 经修饰的高温才会被激活 |
高保真PCR MIX | 具有外切酶活性 |
混合型PCR MIX | 体系中兼顾多种酶优点 |
虽然市场现行的各种PCR预混液看得人眼花缭乱,但是作为它们都有个核心技术点就是DNA聚合酶,只要瞅准了这个点就不会陷入迷茫了!
在我们了解了PCR预混液的类型后,我们还需要在选购的时候评估一些什么点呢?
产品稳定性评估
像pcr这种我们科研日常高频的实验动作,产品成熟度、稳定性是必须考量的。而我们可以通过评估一个品牌公司的历史、生产MIX的历史以及使用经验、paper引用量等来评估产品的稳定性。
自己的实验情况
在这里我们还要知道的是,高保真DNA聚合酶产物不能用于TA 克隆;染料也是我们需要注意的点,有染料虽然可以使我们后续的核酸鉴定变得轻松,但是染料也会影响后续的DNA复制等。所以,大家在选购PCR MIX的时候一定要结合自己的实际需求。
好的,上边说了这么多理论性的东西,为了让大家更好地理解,也随便种草一下三三自家的一个PCR MIX(哈哈),下边我给大家介绍一下我们家的Solis BioDyne PCR MIX系列,欢迎大家点评啦!
Solis BioDyne PCR MIX系列:
货号 | 名称 | 规格 | 单位 |
04-12-00S15 | FIREPol PCR绿色预混合(7.5 mM MgCl2) | 0.1mL | 包 |
04-25-00S15 | 热启动FIREPol混合酶绿色预混液(7.5 mM MgCl2) | 0.1mL | 包 |
06-16-0000S | FIREScript逆转录预混液(含4种引物组合) | 20rxn | 包 |
08-17-0000S | FIREPol探针法qPCR预混液 | 0.2mL | 包 |
08-36-0000S | FIREPol染料法EvaGreen定量PCR超级预混液 | 0.2mL | 包 |
08-55-0000S | SOLIScript一步法多重探针法qPCR试剂盒 | 50rxn | 包 |
24-22-0000S | SolisFAST 快速PCR绿色预混液(含UNG酶) | 0.2mL | 包 |
Solis BioDyne
Solis BioDyne来自欧盟-爱沙尼亚共和国,成立于1995年;欧洲PCR试剂生产领导者。所有产品都已通过ISO9001和ISO13485认证。增加多肽稳定性的配方和相关方法已申请欧盟、美国、韩国专利专利,高标准的生产标准和服务使Solis BioDyne成为全球值得信赖的首选PCR供应商。Solis BioDyne的DNA聚合酶,PCR Master Mixes,qPCR Mixes和其它试剂畅销110多个国家,深受各国研究者青睐,包括顶级研究机构和生物技术公司。
产品特点
1)独特性:常温下酶活性稳定。加上Stability TAG,使多肽在室温下更稳定,含稳定标签的FIREPOL DNA聚合酶活性更稳定;
2)5X预混液:有更大的空间加入样品、引物和探针;做多重实验更方便;
3)通用型Taq DNA聚合酶,价格便宜,性能可靠;
4)FIREPol热启动DNA聚合酶是化学修饰型,活性封闭更彻底,(95℃热启动10-12min进行激活)
5)减少风险、精简包装、降低成本;
产品优势
1)高稳定性:Delays in Customs(报关延迟);Trips in suitcase(放进行李箱);Power outages(冰箱停电);Convenient reaction set-up at room temperature(在室温配置反应体系更方便);Perfect for high-throughput platforms(通量高了也不影响);Absentmindedness(忘记收起来);
2)低成本 :减少干冰、泡沫盒及包装箱运输上造成的成本;
3)活性稳定
※ 所有产品室温保存1个月后,活性完全无损失。
※ Stability TAG improves also long-term stability of our enzymes stored at -20℃(稳定性标签也能提高保存在-20℃的稳定性);
特色产品介绍
1)采用SolisFAST DNA聚合酶的终点法PCR预混液用于快速PCR;
SolisFAST DNA聚合酶是采用寡核苷酸原理的热启动,只需热激活30秒,延伸速度是Taq DNA聚合酶的3-4倍,掺入dUTP的速度更快,PCR运行时间由120分钟缩减到20-40分钟。
2)使用dUTP和UNG酶可以降低假阳性,消除PCR产物污染;
3)FIREPol热启动多重PCR预混液,节省时间,节省试剂;
4)Ready-to-Load PCR Master Mixes:可以直接电泳上样,琼脂糖电泳后产生黄、蓝两色条带;
5)染料法荧光实时定量PCR:EvaGreen染料-安全无毒又稳定;与SYBR Green相比,对反应的抑制更低;Bright and sensitive SolisGreen® dye 特异性和重现性更佳;
6)HOT FIREPol®EvaGreen® Supermix热启超级预混液;用于高GC含量的扩增;在其他品牌仪器上通用;加样时就能看得见(含dUTP);
7) 快速qPCR要用含SolisFAST DNA聚合酶的预混液;SolisFAST® Probe qPCR Mixes;运行时间由2小时缩短至50分钟;多至5重qPCR;含UNG酶和dUTP;
8)含热启动FIREPol DNA聚合酶的标准扩增速度探针法qPCR预混液;探针法通用试剂;兼容其他仪器;适用于高GC含量;含参比染料;能做多重;
9)逆转录 FIREScript® is Fast and Flexible 能用于复杂样本;有RNA酶H活性;耐受37-60℃;至少能延伸8kb的模板;灵敏检测低至0.01ng样本;
文
参考文献
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