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原创 校准和检定,两种计量术语,十处区别
校准与检定都属于量值溯源的一种有效合理的方法和手段,目的都是实现量值的溯源性。校准周期根据计量器具使用的频次或风险程度自行确定,可以进行周期校准,也可以不定期校准,还可在使用前校准。校准的对象是属于强制性检定之外且没有计量检定规程或现行检定规程不适应以及无手段检定的计量器具。检定的对象是我国计量法明确规定的强制检定的计量器具。检定的主体是从事检定的工作人员必须是经考核合格,并持有有关计量行政部门颁发的检定员证。检定的目的是对计量器具的计量特性进行强制性全面评定,是自上而下的量值传递过程。
2023-08-11 11:12:27
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原创 数据库攻略 | 一文了解蛋白质分类、蛋白质结构、功能和相互作用分析的数据库
STRING 广泛应用于科学界,为蛋白质-蛋白质相互作用分析提供了宝贵的资源,包含来自 5,000 多种不同生物的超过 2,400 万种蛋白质的信息,并且该数据库会定期更新。蛋白质是氨基酸的聚合物,二十种不同类型的氨基酸天然存在于蛋白质中,根据构成多肽主链的氨基酸的类型、数量和序列,蛋白质彼此不同。ExPASy 还提供对其他几种蛋白质分析工具的访问,包括用于蛋白质结构预测、蛋白质功能预测和蛋白质-蛋白质相互作用分析的工具。蛋白质-蛋白质相互作用分析是识别与特定蛋白质相互作用的蛋白质的过程。
2023-08-10 13:45:04
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原创 避坑,微生物培养的污染因素及预防方法
一旦发生生物危害物品的溢出,尤其是含有病原微生物的培养物的溢出时,会导致微生物的生长和繁殖,从而引起培养箱的污染。因此,在微生物培养的过程中,需要保持适宜的温度和湿度,以有利于微生物的生长。另外,药典要求培养皿倒置培养,这是因为经过多次验证发现,当培养箱运行时的风向与培养皿盖的朝向不一致时,容易引入空气中的灰尘、杂菌等,从而污染培养物。为了保证实验结果的准确性,需要在使用培养箱进行微生物培养时,注意控制风速和风向、选择合适的培养皿、控制湿度、避免培养物溢洒以及注意自然环境的卫生状况。
2023-08-09 10:26:57
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原创 干货分享 | 手把手教你做“蛋白纯化”
3、小诱导摸索最佳诱导条件:将摇过夜的菌液1:1000接种到3mL LB中,37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8,加入不同浓度IPTG(0.1-1mM),不同温度下诱导,随着温度降低,诱导时间延长,如37 ℃ 诱导4-5h,30°C诱导6h-8h,16°C诱导16-20h,取不同诱导条件下诱导前和诱导后的菌液,跑胶,考染,观察诱导结果;当有乳糖存在时,乳糖进入细胞,经β-半乳糖苷酶催化,转变为异乳糖,异乳糖结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离,从而启动转录。
2023-08-08 11:29:10
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原创 选对动物给药方式,给延毕说声“NO”!
经皮给药方式简单,递送大分子药物也不在话下,经皮给药可以在不受pH值、酶和肠道细菌干扰的情况下输送大多数不能口服的肽类或蛋白质类药物,经皮给药目前主要用于研究药物或毒物经过皮肤的吸收效果以及对皮肤的局部作用、致敏作用和光感作用等。相信科研的童鞋们,在动物实验方案确定后,第一步讨论的就是动物给药方式,给药途径会影响药物的吸收、生物利用度和特定实验的适宜性,同学们需熟悉各种途径,以最佳方式对动物进行给药。常用的口服给药方式包括直接口服(将药物混入水或饲料中,动物自己觅食)和被动口服给药(灌胃)。
2023-08-07 10:22:35
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原创 酵母的培养与冻存
常用的液态培养基有 YPD 培养基(酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖培养基)、SD 培养基(合成培养基)、SC 培养基(选择性合成培养基)等;将待分离酵母样品加入含有蒸馏水的试管中,用移液枪或自动移液器将悬浮液均匀地滴在含有琼脂的培养皿上,等待培养基凝固后进行培养。5. 在复苏冻存酵母时,将冻存管从 -80 ℃ 冰箱中取出,尽快放入含有 YPD 液体培养基的培养瓶中,避免细胞受到温度波动的影响。将培养的酵母菌株在对数生长期收获,加入等体积的冻存液中,混匀后分装于冷冻管中,放置于 -80 ℃ 或液氮中冷冻保存。
2023-08-04 13:53:42
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原创 干货分享|实验室毒性最大的17种试剂,做好安全守护,莫大意!
神经毒性作用表现为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化,试验还显示丙烯酰胺是一种 可能致癌物,职业接触人群的流行病学观察表明,长期低剂量接触丙烯酰胺会出现嗜睡、情绪和记忆改变、幻觉和震颤等症状,伴随末梢神经病如手套样感觉、出汗 和肌肉无力。DMSO是毒性比较强的东西,用的时候要避免其挥发,要准备1%-5%的氨水备用,皮肤沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗涤.最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤、和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。很强的还原剂,散发难闻的气味。
2023-08-02 11:44:17
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原创 干货分享|选对实验室常用培养基DMEM和1640,节省实验室开支
此外,除了这些特定配方的即用型培养基意外,还有定制型的培养基,它是指需要根据特定的配方和比例来自行配制的培养基。需要配制的培养基通常包括无血清培养基、低血清培养基、添加了特殊因子的培养基等。培养基有很多不同的名字是因为根据不同细胞的培养和应用场景,培养基可以分为多种类型,最常见的是DMEM、RPMI-1640、MEM等。这种培养基通常用于常见的细胞培养实验中,只要按照合适比例加入血清,就成为了完全培养基,就可以应用于细胞的日常培养、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡等实验中。为什么细胞培养基有那么多不同的名字?
2023-08-01 11:07:26
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原创 Lancet | PD-1和VEGFR2口服TKI联合治疗一线不可切除肝细胞癌,III期临床延长PFS和OS
最常见的3级或4级治疗相关不良事件是高血压(Camrelizumab-Rivoceranib组272例患者中有102例[38%],Sorafenib组269例患者中有40例[15%])、手掌-足底红感障碍综合征(33例[12%]对41例[15%])、天冬氨酸转氨酶升高(45例[17%]对14例[5%])和丙氨酸转氨酶升高(35例[13%]对8例[3%])。与Sorafenib组相比,联合治疗的生存益处得到了显著更高的反应率和更持久的反应,以及更高的疾病控制率的支持。
2023-07-31 13:20:17
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原创 干货分享 | 知其然知其所以然,WB、IP、IHC、IF、ChIP、FC六种抗体的区别
生物医学领域的研究离不开抗体,WB(western blot,蛋白质印迹),IP(immunoprecipitation,免疫沉淀),IHC(immunohistochemical,免疫组化),IF(immunofluorescence 免疫荧光),ChIP(Chromatin immunoprecipitation,染色质免疫沉淀),F(flowcytometry,FC,流式细胞术) 都需要用到抗体,那么这几种实验方法中的抗体有什么区别呢?一般而言,抗体研发出来之后都要经过WB,IP,IF,IHC实验。
2023-07-27 14:11:16
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原创 干货分享 | 5分钟掌握免疫组化实验
先以酶标记的抗体作用于组织或细胞,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性物质或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对其进行定位,从而对细胞内抗原进行定位或定性研究的一种方法。从待测组织或细胞中提取蛋白作为抗原,先与一抗结合形成抗原抗体反应物,再与生物素或荧光素标记的二抗反应,通过化学显色可以在显微镜下清晰观察到抗原抗体反应物,从而能在组织切片上确定抗原的分布和含量。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而对组织中的抗原进行定位或定量。2.种属来源:根据一抗的来源决定二抗的选择。
2023-07-26 10:56:21
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原创 知识科普|免疫细胞—CIK细胞和NK细胞,那一个更重要?
NK细胞和CIK细胞在抗肿瘤方面,二者细胞类型不同,表型不同,对肿瘤细胞的杀伤机理不一样。也就是说CIK细胞数量可以较大,但是NK细胞数量有限,针对肿瘤患者治疗过程中,还是以CIK细胞为主,NK细胞可以作为提高免疫力方面进行协同治疗。CIK细胞,即细胞因子诱导的杀伤细胞是一种新型的免疫活性细胞,又称为NK细胞样T淋巴细胞,兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性,该细胞对肿瘤细胞的识别能力很强,如同“细胞导弹”,但不会伤及“无辜”的正常细胞。■ 通过细胞表面合成的蛋白激活靶细胞凋亡系统杀伤肿瘤细胞;
2023-07-26 10:51:25
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空空如也
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