Enzo Life Sciences：ProteoStat®热转移稳定性检测试剂盒

Enzo Life Sciences成立于1976年，总部设于美国纽约，在研发、生产、销售生物研究试剂方面拥有40多年的成功经验，涉及靶标鉴定及验证、高通量分析、基因表达分析、蛋白质检测及细胞分析等相关领域，可提供蛋白、抗体、多肽、小分子、标签探针染料及试剂盒等一万余种产品。

Enzo提供的ProteoStat®热转移稳定性检测试剂盒(货号：ENZ-51027)包含检测蛋白质聚集的荧光染料，因此该产品可用于监测系统热应力条件下的蛋白质稳定性。从热转移试验中，可以容易地确定大部分蛋白质聚集的温度。聚集温度是蛋白质稳定性的指标，可用于优化使蛋白质聚集最小化的条件，以及鉴定结合感兴趣蛋白质并赋予其结构稳定性的配体。该试剂盒可直接用于监测热诱导蛋白变性引起的蛋白聚集，不会检测蛋白非折叠而暴露的疏水部分。该试剂盒也可用于检测蛋白缓冲液中其他添加成分对蛋白稳定性的影响，以及在特定条件下多少温度时蛋白质会聚集。

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产品信息：

产品货号	产品名称	规格
ENZ-51027-K400	PROTEOSTAT® Thermal shift stability assay kit	1*400tests
ENZ-51027-K100	PROTEOSTAT® Thermal shift stability assay kit	1*100tests

产品特点：

● 是一种不需要样品分离或稀释的简单、灵敏、稳定的荧光分析方法；

● 能够加速优化蛋白质稳定性条件；

● 即使事先不知道蛋白质的功能或配体结合位点，也可以检测配体结合；

● 在较宽的温度、pH值和离子强度范围内工作，并与常用缓冲剂和赋形剂兼容；

● 为仪器密集型技术的交叉验证提供了一种便捷、互补的正交方法。

如图所示，PROTEOSTAT®热转移稳定性检测试剂盒(货号：ENZ-51027)检测山羊抗小鼠IgG(11.2 mg/ml, pH 7.4)的典型结果。使用RT-PCR仪器，以3℃/min的速率将温度从30℃升高到99℃，同时连续读取荧光。蓝线表示原始荧光数据，红线表示相应的一阶导数轨迹，突出显示了荧光强度曲线的斜率。一阶导数图提供了蛋白质的聚集温度(Tagg：最大斜率点)。

蛋白质结构的配体稳定：

如图所示，将碳酸酐酶I（1μM）与0-62.5 mM的TFMSA（三氟甲烷磺酰胺）在25 mM MES、50 mM NaCl、pH 6.1中孵育。PROTEOSTAT®热转移稳定性检测结果表明，配体结合会增加蛋白质的热稳定性，其增加量与配体浓度成比例。

蛋白质在不同缓冲液中的稳定性：

如图所示，在150 mM NaCl存在下，将β-乳球蛋白稀释到不同pH的50 mM缓冲液中，并使用PROTEOSTAT®染料测定聚集温度。

PROTEOSTAT热转移稳定性检测试剂盒（货号：ENZ-51027）引用文献：

Antibody
SAMPLE	REFERENCE	LINK
ADCETRIS	F. Lhospice, et al. (2015)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25625323
Antibody-drug conjugates (ADC)	F. Lhospice, et al. (2015)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25625323
Anti-PA biligand (Bi-LPA)	M.B. Coppock, et al. (2017)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27539157
Anti-PA monoclonal antibody	M.B. Coppock, et al. (2017)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27539157
(Fab')	C. Roque, et al. (2015)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25548945
IgG	A.D. McConnell, et al. (2013)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23173178
IgG	A.D. McConnell, et al. (2016)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25517312
IgG	S. Murakami, et al. (2019)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30679500
Monoclonal antibodies	A. Teplyakov, et al. (2018)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29283291
PEGylated (Fab')	C. Roque, et al. (2015)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25548945
Trastuzumab	S. Murakami, et al. (2019)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30679500

Other proteins
SAMPLE	REFERENCE	LINK
Dihydrofolate reductase variants	S. Bershtein, et al. (2013)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23219534
Endoglucanase I (EGI) proteins	G. Bayram Akcapinar, et al. (2015)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25784767
Hemagglutinin	K.M. Holz, et al. (2014)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25540031
Membrane proteins	I. Vandecaetsbeek, et al. (2016)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26695024
STING proteins	J. Conlon, et al. (2013)	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23585680