转染试剂文章分享:QCKX D,性能优良DNA转染试剂,应用范围以及质粒转染步骤有哪些?

品牌名称:西安凯新生物科技有限公司


产品说明:QCKXR-D是一款性能优良的DNA转染试剂,可用于质粒DNA的传送。它具有较强的DNA转染能力,与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。

用范围: QCKXR-D转染试剂可适用于众多易转染细胞株的DNA转染、瞬时转染及稳定转染。适用于多种贴壁细胞系,特别适用于各种常规细胞如HeLa、293T、COS7、CHO和B16F10等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。

质粒DNA的转染:

以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:

1 细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度
2 质粒稀释: 将0.4µg质粒稀释于Opti-MEM培养基中,终体积10µL
3 复合物制备: 按比例取适量QCKXR-D稀释于OptiMEM培养基中, 终体积10µL,室温孵育5分钟后与质粒稀释液混匀
4 室温静置20分钟
5 每孔20µL 复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养18~48小时后检测基因表达,无需更换培养

质粒DNA的转染优化:
可通过改变细胞密度、 DNA浓度以及GoldenTran-D浓度对转染 进 行 优 化 。 保 证 细 胞 融 合 度 在 60% 以 上 , GoldenTran-D(µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。

 

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