Nature Methods | 新型三维光场显微成像技术

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近日，中科院脑科学与智能技术卓越创新中心王凯研究组在《自然·方法》（Nature Methods）上，在线发表了题为Volumetric Voltage Imaging of Neuronal Populations in Mouse Brain by Confocal Light Field Microscope的研究论文。该研究开发了新型三维光场显微成像技术，提升了神经元电压光学成像的通量。这一技术能够对小鼠脑三维神经网络中数百神经元的膜电位进行高速同步记录，为解析神经网络的信息处理机制提供了新工具。

光场成像需要高灵敏度、大靶面的相机来同时记录多个视角的投影图像。而由于相机的数据带宽受限，大靶面相机的帧率无法满足电压成像的速度需求。

该团队提出通过降低采集图像的动态范围来换取更高的帧率。通常情况下电压成像需要较高的动态范围来捕捉高基线上微弱变化的信号，但该团队采用广义共聚焦原理，高选择性滤除背景来降低信号基线，并整合多个视角的信息，实现了利用低动态范围的相机来高效捕捉微弱的电压信号。

进一步，为了最大限度降低系统的噪声，该团队探讨了光场成像中的噪声来源，发现了激光光源的强度噪声、扫描振镜的同步噪声以及动物血液流动导致的激光散斑噪声均能够降低电压成像的信噪比。同时，该研究提出了基于单振镜双面扫描的共聚焦光场成像技术。这一技术结合高数值孔径的光照明策略和新数据处理方法，将系统噪声降低至泊松噪声理论极限。