6His 标签肽

6His 标签肽是由 6 个组氨酸残基组成的一段短肽，通常用于蛋白质的分离、纯化和检测等实验中。

结构特点

• 6His 标签肽的氨基酸序列为 HHHHHH，相对分子质量较小，一般不会影响目标蛋白的结构和功能。而且组氨酸中的咪唑基可以与多种金属离子发生特异性结合，为其在实验中的应用提供了基础。

实验应用中的作用

• 蛋白质纯化：这是 6His 标签肽最主要的应用之一。利用其能与金属离子特异性结合的特性，将含有 6His 标签的目标蛋白通过亲和层析的方法从复杂的蛋白质混合物中分离出来。具体来说，将含有目标蛋白的样品通过装有固定化金属离子（如镍离子、钴离子等）的亲和层析柱，6His 标签会与金属离子结合，而其他杂质蛋白则会流出层析柱，然后通过改变洗脱液的条件（如增加咪唑浓度或改变 pH 值），使目标蛋白从层析柱上洗脱下来，从而达到纯化的目的。这种方法具有高效、快速、特异性强等优点，能够获得较高纯度的目标蛋白。
• 蛋白质检测：6His 标签可以作为一个特异性的识别位点，用于检测目标蛋白的表达和定位。例如，通过使用抗 6His 标签的抗体进行 Western blot、免疫荧光等实验，可以方便地检测到目标蛋白在细胞中的表达水平、分子量大小以及细胞内的定位情况。此外，在一些蛋白质相互作用的研究中，也可以利用 6His 标签来捕获与目标蛋白相互作用的其他蛋白质，进而通过质谱等技术进行鉴定和分析。
• 蛋白质固定化：在一些实验中，需要将蛋白质固定在特定的载体表面，以便进行后续的研究或应用。6His 标签可以与一些含有金属离子的载体表面发生特异性结合，从而实现蛋白质的固定化。例如，将含有 6His 标签的酶固定在金属离子修饰的多孔材料上，制备成固定化酶，用于催化反应的研究和工业生产等领域。这种固定化方法能够保持酶的活性，并且可以重复使用，具有较高的经济价值和应用前景。