液氮超低温保存法的原理

细菌保存是有效保存活体微生物群体，使细菌不死、不衰、不变，便于研究和应用。保存细菌的方法有很多。保存原理是利用干燥、低温、隔离空气的方法，降低微生物菌株的代谢速度，使菌株的生命活动处于半永久性休眠状态，从而达到保存的目的。

液氮超低温保存法的原理是冷冻细胞，停止其代谢活动，使细胞长期处于休眠状态。一般来说，储存温度越低，效果越好。在液氮中，温度可以达到-196℃。因此，液氮超低温保存法是一种理想的保存方法，具有适用的微生物范围、生存期和状态稳定性。

菌种在-196℃保存时，其存活率受冷冻速度的影响尤为明显。一般来说，应在菌种悬浮液中加入防冻剂。最常用的冷冻保护剂是二甲丙烯酸和甘油，冷冻效果慢。

这种方法一般保存菌种20年以上。除了适用于普通微生物的保存外，一些微生物，如支原体、衣原体、氢细菌、霉菌、噬菌体和动物细胞，也很难形成孢子，性状不变。对于只在培养基上产生菌丝体的真菌，尤其是担子菌中的菌株，必须用这种方法保存，才能取得令人满意的效果。只要有液氮罐或液氮冰箱设备，这种方法的操作技术并不复杂。