生物化学复习题I·蛋白质

1.蛋白质占人体干重的____ %。
2.请写出氨基酸根据侧链基团的分类方式，并写出每类中包含的氨基酸的名称及缩写。
3.非极性脂肪族R基团的氨基酸包括__________________，它们多位于蛋白质______ ，通过______ 稳定蛋白质的结构。
4.______ （填氨基酸名称）因为_______________________ 的结构特征，被称为亚氨基酸。
5.含硫氨基酸有_______ ，按侧链基团分类，分别属于_______________________ 。
6.氨基酸中不具有旋光性的为_______ ，其R基为_____ 。
7.带苯环的氨基酸有___________ ，带吲哚环的氨基酸有_____ 。
8.简述二硫键的形成方式及作用。
9.带负电荷R基团的极性氨基酸有__________ ，它们带负电的原因是R基中含有_______ 。
10.简述氨基酸具有两性的原因，及氨基酸等电点的概念。
11.由于_________ （氨基酸名称）的最大吸收峰在_____ nm附近，故可通过_____________分析溶液中蛋白质含量。
12.氨基酸_______________ 可生成蓝紫色化合物，最大吸收峰在_____ nm处；
由于________________________________ ，故可据此进行氨基酸的定量分析。
13.简述氨基酸的主要功能，并各举一例。
14.蛋白质的一级结构的定义是_________________________ ，含有_____ 键和_____ 键。
15.简述肽单位的定义及特性。
16.简述蛋白质的二级结构的定义及决定其稳定性的主要因素，并写出5种常见二级结构。
17.α-螺旋是_______________ ，每隔____ 个氨基酸上升一圈，每个氨基酸向上平移____ ，螺旋半径为_____ ，α-螺旋稳定性的主要来源是___________________________________ ，α-螺旋又名________ ，蛋白质中的α-螺旋主要是_____ ，位于螺旋外侧的是__________ ，其对螺旋的影响方式是__________________________________________________________。
18.β-折叠使多肽链形成_____ 结构，各肽键平面间折叠形成_____ 结构，侧链R基团位置是_________________________ ，靠_________________________ 形成的_____ 维系，肽段走向有_____ 和_____ 两种方式，后者较稳定、较常见的原因是_______________________ ，后者每个氨基酸残基上升_____ nm。
19.β-转角可使肽链_______________ ，利于__________ 形成；通常由____________ 组成，稳定性的来源是_______________ ；其中经常出现的氨基酸有__________ 。
20.β-凸起的形成原因是_________________________________ ，主要存在于__________ 。
21.简述蛋白质三级结构的定义，写出五种稳定三级结构的化学键；写出三级结构的组成，并分别举出5种常见实例。
22.简述蛋白质四级结构的定义，并写出维系四级结构的化学键。
23.写出蛋白质的至少6种功能，并各举一实例。
24._____ 是决定蛋白质的功能的直接原因，_____ 是决定蛋白质功能的根本原因。
25.按照分子形状、溶解性质以及是否与膜结合，蛋白质可分为________________________ 。
26.纤维状蛋白质的主要性质有__________________________________________________ ，形成有规则的纤维状结构的原因是_________________________ 。
27.主要存在于动物毛发中的纤维状蛋白质是_____ ，稳定其四级结构的化学键是_____ 。
28.β角蛋白主要来源有_____ （举一例），二级结构主要有_____ ，该蛋白具有抗张性和弹性分别因为具有_____和_____的二级结构。
29.胶原蛋白的基本组成单位是______________________________ ，一级结构中含量最高的氨基酸是_____ ，其有规律重复的三联体序列决定了其形成的__________ 结构，它是_____ 的主要成分（举一例）。
30.球状蛋白质主要有_____ 和_____ 两种，其中后者没有四级结构，它们都可与____ 结合，原因是该物质与球状蛋白质中的_____ 形成配位键。
31.Hb具有的_____ 、_____ 、_____ 三种效应利于其行使运输氧气的功能。
32.Hb与Mb氧合曲线的区别是_______________ ，原因是________________________ 。
33.蛋白质具有亲水胶体性质的原因是______________________________ ；影响蛋白质胶体稳定的因素是_____________________________________________。
34.写出使蛋白质沉淀的四种方法，并分别简述其机理。
35.简述蛋白质变性的概念、本质、造成变性的因素、变性前后的区别。
36.水解蛋白质的三种方法是___________________________________。
37.简述定量测定蛋白质的一种颜色反应的机理。
38.简述蛋白质纯化的步骤，并写出分离纯化蛋白质的4种常见方法的名称。
39.简述电泳的定义，并列举影响电泳速度的主要因素。
40.写出两种电泳方法并分别简述原理。
41.简述层析的定义，列举4种常见的层析方法并分别简述原理。

答案

1.45
2.非极性脂肪族氨基酸 极性不带电
甘氨酸 Gly 丝氨酸 Thr
丙氨酸 Ala 苏氨酸 Ser
缬氨酸 Val 半胱氨酸 Cys
亮氨酸 Leu 天冬酰胺 Asn
异亮氨酸 Ile 谷氨酰胺 Gln
脯氨酸 Pro
甲硫氨酸 Met 带正电
赖氨酸 Lys
芳香族氨基酸 精氨酸 Arg
苯丙氨酸 Phe 组氨酸 His
酪氨酸 Tyr 负电 谷氨酸 Glu
色氨酸Trp 天冬氨酸 Asp
3.甘氨酸 Gly丙氨酸 Ala缬氨酸 Val亮氨酸 Leu异亮氨酸 Ile脯氨酸 Pro甲硫氨酸 Met 内部 疏水性
4.脯氨酸 有含氮杂环
5.半胱氨酸，甲硫氨酸 极性不带电，非极性脂肪族
6.甘氨酸 H
7.苯丙氨酸，酪氨酸 色氨酸
8.两个半胱氨酸的巯基脱氢，形成二硫键；维持蛋白质的结构稳定。
9.谷氨酸、天冬氨酸 羧基
10.氨基酸同时具有酸性的羧基和碱性的氨基，是两性电解质。等电点指氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势和程度相等时的pH。
11.色氨酸，酪氨酸 280 测定280nm时的吸光度
12.与茚三酮水合物共热反应
570
吸收峰值与氨基酸的含量成正比
13.作为多种肽的组成单位；作为多种生物活性物质的前体；作为神经递质；碳骨架分解产生ATP；糖异生或酮体合成前体
14.氨基酸从N-端到C-端的排列顺序 肽 二硫
15.肽键的四个原子及相邻的两个α碳原子组成的刚性平面；
具有部分双键性质，多为反式，也有顺式；参与肽键形成的六个原子在同一平面上；N带正电，O带负电
16. 主链部分中局部形成的有规律的折叠盘绕，稳定性取决于主链氢键；α-螺旋，β-折叠，β-转角，β-凸起，无规卷曲与环
17.多肽链围绕中心轴有规律的螺旋式上升；3.6；0.15nm；0.23nm；第n个氨基酸的羰基氧和第n+4位残基上亚氨基氢形成氢键；3.6（13）螺旋；右手螺旋；R基；其带电、大小、形状影响螺旋的形成和稳定性
18.片层；锯齿状；侧链基团垂直于相邻两个肽平面交线，交替分布在折叠片层两侧；羰基氧与亚氨基；氢键；正平行；反平行；氢键中NHO几乎共面；0.347
19.出现180°回折；反平行的β折叠；4个连续的氨基酸残基；第一个的羰基氧和第四个的亚氨基氢形成氢键；Gly、Pro
20.b折叠中两个b股中一股多出一个氨基酸残基打破了氢键结构使肽链轻微弯曲；反平行的β折叠
21.指多肽链在二级结构基础上盘绕卷曲折叠形成特定的空间结构，包括肽链上所有原子空间排布；盐键，氢键，范德华力，二硫键，疏水键；模体（β发夹环、bab、EF手相、aba、希腊钥匙模体）、结构域（a结构域、b结构域、a/b结构域、a+b结构域、交联结构域）
22.两个或两个以上的亚基之间相互作用，彼此以非共价键相联而形成更复杂的构象，称为蛋白质的四级结构；疏水键、盐键、氢键、范德华力
23.生物催化剂 酶
调节蛋白 激素，受体，信号转导分子
转运蛋白 物质转运
收缩或运动蛋白 肌动蛋白，肌球蛋白，动力蛋白
防御蛋白 免疫球蛋白
营养和储存蛋白 酪蛋白，铁蛋白
结构蛋白 胶原蛋白，角蛋白，弹性蛋白
其他蛋白 蛋白毒素
24.三维结构，一级结构
25.纤维状蛋白，球状蛋白，膜蛋白
26.结构比较简单，一般伸展为纤维状，长/宽 ＞10，不溶于水或稀盐溶液，机械强度高，在生物体充当结构支持的角色，如角蛋白和胶原蛋白。
其一级结构的高度规律性——氨基酸残基的种类有限，但序列通常以重复的形势出现
27.结构支持，二硫键
28.蜘蛛丝；β折叠；β片层；α螺旋和无规卷曲
29.3条α链组成的原胶原分子 Gly 三股螺旋 肌腱
30.血红蛋白 肌红蛋白 O2 Fe2+
31.正协同效应 波尔效应 别构效应
32.Hb为S型，Mb为双曲线；Hb具有正协同效应
33.分子颗粒在1-100nm，表面有亲水基团；表面电荷、水化膜
34.
盐析：
在蛋白质水溶液加入大量高浓度中性盐使蛋白质从溶液中析出
机理：破坏蛋白质水化膜，中和表面电荷
不使蛋白质变性
PI（等电点）沉淀
蛋白质在等电点附近溶解度最小易沉淀析出
有机溶剂引起的沉淀
在蛋白质溶液中加入与水互溶的有机溶剂（如乙醇丙酮等）使之沉淀
机理：破坏蛋白质的水化膜
通常在低温进行，否则会使蛋白质变性
重金属作用造成沉淀
条件：pH大于pI
机理：重金属盐（正电）与蛋白质负离子结合
35.概念：在某些理化因素作用下，蛋白质空间构象被破坏，导致理化性质改变生物活性丧失
本质：破坏非共价键及二硫键，不改变一级结构
物理因素：加热，冷却，机械作用，流体压力，辐射
化学因素：强酸，强碱，高浓度盐，尿素，重金属盐，疏水分子，有机溶剂
溶解度降低、黏度增加、生物活性丧失、更易被水解、结晶行为发生变化
36.酸水解、碱水解、酶水解
37.两个相邻肽键在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色络合物，颜色深浅与蛋白质浓度呈正比（双缩脲反应）
38.破碎细胞或组织（混合和匀浆）、去除残渣（离心）、沉淀/浓缩（硫酸铵或聚乙二醇）、纯化（层析）、鉴定。
沉淀离心、透析超滤、电泳、层析
39.带电颗粒在电场中移动的现象称为电泳；泳动速度取决于所待电荷的性质、数量、颗粒大小和形状等因素。
40.等电点电泳（IEF）：在等电点时蛋白质净电荷为0，不泳动
聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）：完全按相对分子质量分离蛋白质
41.通过在流动相和固定相之间的多次反复分配将复杂的分子混合物分离的过程。
离子交换层析
利用各蛋白质的电荷量及性质不同进行分离
疏水作用层析
利用不同蛋白质疏水性质差别对蛋白质进行纯化
亲和层析
利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别能力建立起来的纯化方法
凝胶过滤（分子筛层析）
按大小分离物质，大分子路径短、速度快，不能进入凝胶颗粒内部

2020年12月26日11:41:22
全文完 但不保证不会随时修改