钙粘蛋白CDH：肿瘤靶点研究新秀

前 言：

钙粘蛋白是钙依赖性细胞间粘附的重要介质，属于跨膜糖蛋白。钙粘蛋白在组织稳态中起重要作用，促进组织发育、突触粘附和上皮屏障功能。钙粘蛋白功能改变与癌症进展、血管疾病和其他病理学有关。目前多种钙粘蛋白有望成为治疗靶点，如CDH1、CDH2、CDH3、CDH6、CDH17等，具有治疗癌症如胃癌、结肠癌和转移性肿瘤以及疾病如黑色素瘤、纤维化、婴儿呼吸窘迫综合征和糖尿病视网膜病变的潜力。

钙粘蛋白概述：

钙粘蛋白（Cadherin，简写CDH）是细胞粘附分子，在维持正常状态下的组织结构和形态方面起着重要作用，CDH的表达失调往往与疾病有关，包括组织发育不良、肿瘤形成和转移。

钙粘蛋白是钙依赖性粘附分子的超家族，至少有六个亚家族，CDH家族拥有23个成员，从CDH1到CDH26。生理学上，钙粘蛋白有助于形成紧密连接和粘附连接，这对上皮屏障功能至关重要，调节神经系统内的突触粘附，影响学习和记忆。病理学上，钙粘蛋白表达或功能的改变与癌症进展相关。

许多致癌信号通路修饰钙粘蛋白细胞-细胞粘附，如p27介导的信号传导、MAPK、Ras、Rac1信号传导、PI3K/AKT信号传导以及Hippo信号传导。钙粘蛋白的异常表达与肿瘤的转移、血管生成、粘附和侵袭有关。如在肿瘤细胞中TGF-β1、Wnt/β-catenin、EGFR和NF-κB等调控CDH2的表达。

CDH17与Claudin18特异性靶点相似，在正常组织中仅位于并局限于肠上皮细胞之间紧密连接的侧膜上，不表达在顶端或底面，但在肿瘤细胞表面表达。CDH17在超过50%胃癌、90%~95%结直肠癌、53%胆管癌，50%胰腺癌及部分肝癌中表达。CDH17与多种实体瘤预后相关，在胃癌和结直肠癌患者中，CDH17高表达与更短的生存期和疾病无进展相关。

重组钙粘蛋白研究应用：

重组钙粘蛋白在各种生物医学研究中至关重要，包括细胞粘附、癌症、药物筛选和心血管研究。研究人员使用这些蛋白质来探索细胞行为、粘附机制、自身抗体介导的切割和病毒-宿主相互作用，为疾病治疗和药物开发提供帮助。

Eftekharjoo等人以重组CDH1（E-Cadherin）-Fc蛋白（购自义翘神州，货号：10204-H02H）为涂层构建软硅胶基质，研究E-Cadherin蛋白粘附机制，对以上皮细胞弹性改变为特征的癌症等疾病治疗具有重要意义。Li等人以CDH2重组蛋白（购自义翘神州，货号：11039-H08H）为抗原，构建scFv全人源噬菌体展示文库筛选双特异性抗体，并通过ELISA验证抗体与CDH2重组蛋白的亲和力。Yeruva等人以CDH2（N-Cadherin）重组蛋白（购自义翘神州，货号：11039-H03H）进行免疫染色解离、WB免疫印迹等分析，结果发现致心律失常性心肌病（AC）患者自身抗体对CDH2和DSG2具有催化活性，减少粘附分子间的相互作用。Shen等人研究发现颗粒酶B（GzmB）裂解重组CDH5（VE-Cadherin）蛋白（购自义翘神州，货号：50192-M08H）导致内皮屏障功能破坏和血管通透性增加，影响心脏纤维化发展。Zhao等人通过体外裂解实验确定CDH6（购自义翘神州，货号：10150-H08H）和CDH12（购自义翘神州，货号：10317-H08H）是蛋白酶3CLpro的新型底物，为进一步加深SARS-COV-2与宿主相互作用机制的了解。

用于基质涂层

设计具有亚kPa和几kPa弹性的定向重组CDH1（E-Cadherin）-Fc蛋白（购自义翘神州，货号：10204-H02H）涂层的软硅胶基质，发现肌动蛋白以两种不同方式组织E-Cadherin粘附。doi: 10.1021/acsbiomaterials.2c00253

用于ELISA检测

ELISA包埋CDH2重组蛋白（购自义翘神州，货号：11039-H08H）检测anti-Ncad scFvs抗体亲和力，其中A6显示出高亲和力，解离常数低至1.5nM。doi：10.1093/protein/gzv024

用于免疫印迹检测

来自AC患者（AC1-15）及健康对照供体的IgG，不经过或经过蛋白酶抑制剂处理（C或I），加入200ng CDH2（购自义翘神州，货号：11039-H03H），37℃孵育4小时后，通过SDS-PAGE分析IgG对CDH2的裂解效果（#表示被切割的片段）。Doi: 10.1007/s00018-023-04853-1

GzmB介导的CDH5（购自义翘神州，货号：50192-M08H）裂解的蛋白印迹结果。箭头指示CDH5裂解的片段，丝氨酸蛋白酶抑制剂SA3N的存在抑制CDH5的裂解。Doi: 10.1016/j.ajpath.2015.09.010.

用于免疫印迹和质谱检测

体外裂解实验验证CDH6（购自义翘神州，货号：10150-H08H）和CDH12（购自义翘神州，货号：10317-H08H）是3CLPro的新型底物。图A：CDH6和CDH12裂解电泳图，泳道1和4为3CLpro，泳道2和5分别为CDH6和CDH12重组蛋白，泳道3和6为3CLpro与CDH6或CDH12在37℃孵育4h后样品。红色“←”表示CDH的裂解片段。图B：加入PNGase F确定CDH6和CDH12的N端裂解片段。图C和D：质谱分析CDH6和CDH12裂解和脱糖N端片段的质量。Doi: 10.1016/j.jbc.2023.104831

✦义翘神州CDH特色产品：

义翘神州的产品已支持多篇文章发表在国内外学术期刊，涉及到的产品有重组蛋白、抗体、ELISA试剂、基因等。

Human CDH17 Protein (His Tag) (Cat: 11360-H08H)

Recombinant Anti-N Cadherin Antibody, Rabbit Monoclonal (Cat: 11039-R020)
· 应用：WB、ELISA、FCM、ICC/IF

Anti-H Cadherin Antibody, Rabbit Polyclonal (Cat: 51163-T52)
应用：WB、ELISA、IP

【参考文献】

1. Kaszak, I. et al. Role of cadherins in cancer—a review. International Journal of Molecular Sciences, 2020. https://doi.org/10.3390/ijms21207624

2. Marie, P. J. et al. Cadherin-mediated cell-cell adhesion and signaling in the skeleton. Calcified Tissue International, 2014. https://doi.org/10.1007/s00223-013-9733-7

3. Liu, L. X. et al. Targeting Cadherin-17 Inactivates Wnt Signaling and Inhibits Tumor Growth in Liver Carcinoma. Hepatology, 2009.

4. Casal, J. I. & Bartolomé, R. A. Beyond N-cadherin, the relevance of cadherins 5, 6 and 17 in cancer progression and metastasis. Int J Mol Sci, 2019.

5. Eftekharjoo, M., Mezher, M., Chatterji, S. & Maruthamuthu, V. Epithelial Cell-Like Elasticity Modulates Actin-Dependent E-Cadherin Adhesion Organization. ACS Biomater Sci Eng, 2022.

6. Yeruva, S. et al. Catalytic antibodies in arrhythmogenic cardiomyopathy patients cleave desmoglein 2 and N-cadherin and impair cardiomyocyte cohesion. Cellular and Molecular Life Sciences, 2023.

7. Zhao, K., et al. Identification of SARS-CoV-2 PLpro and 3CLpro human proteome substrates using substrate phage display coupled with protein network analysis. Journal of Biological Chemistry, 2023.

8. Shen, Y. et al. Granzyme B Deficiency Protects against Angiotensin II-Induced Cardiac Fibrosis. American Journal of Pathology, 2016.

9. Li, K. et al. A fully human scFv phage display library for rapid antibody fragment reformatting. Protein Engineering, Design and Selection, 2015.