LHC-like蛋白：光合作用的守护者--文献精读1

LHC-like Proteins: The Guardians of Photosynthesis

LHC-like蛋白：光合作用的守护者

摘要

叶绿素捕光复合物（LHCs）的出现是光合真核生物进化的一个重要里程碑。光收集叶绿素结合蛋白在光系统Ⅰ和Ⅱ的反应中心附近形成复合物，并作为天线，将收集的光能汇集到反应中心，促进光化学猝灭，从而优化光合作用。现在人们普遍认为，LHC蛋白是从LHC-like蛋白进化而来的，LHC-like蛋白是一个包含多达四个跨膜螺旋的多样化蛋白家族。有趣的是，LHC-like蛋白在弱光下不参与光收集来提高光合作用活性。相反，它们通过耗散多余的能量和参与非光化学猝灭过程来保护光系统。虽然有证据表明LHC-like蛋白是光保护的关键因素，但只有少数几种蛋白的研究较多，主要是与应激相关的psbS和lhcSR。在这里，我们总结了关于各种LHC-like蛋白的进化和功能的知识，重点介绍了那些与光保护密切相关的蛋白质。我们进一步建议LHC-like蛋白作为改善重要粮食作物光合作用的候选蛋白，并讨论了其未来的研究方向。

1.除光捕获功能外，光捕获蛋白对光抑制的保护很重要

光捕获叶绿素结合复合物（LHCs）在真核光合生物中进化，以增强光系统Ⅰ和Ⅱ (PSⅠ和PSⅡ)的吸收截面。LHCⅠ和LHCⅡ在类囊体膜中与PSⅠ和PSⅡ （PSⅠ-LHCⅠ和PSⅡ-LHCⅡ）形成巨型复合物，并通过结合叶绿素a和叶绿素b来收集光能，收集到的光能被定向到光系统的反应中心（RCs），以驱动电荷分离和光合作用（图1）。

图1。HL过程中的光合作用，并揭示LHC-like蛋白的光保护作用。光在LHC中收集，并被传递到到PSⅡ的光合作用中心，在那里它激发一个特殊的叶绿素对(P680)并启动电荷分离和线性电子流(LEF)。电子通过QA从mpsil - rc转移到QB，然后加入质体醌(PO)池。从PQ，电子移动到细胞色素b6f, PSⅠ和铁氧还蛋白NADPH还原酶(FNR)(未显示)。FNR将NADP+还原为NADPH，并通过Calvin-Benson-Basshamcycle进一步用于固碳反应。在HL期间，PSⅠ和PSⅡ能量饱和。由于水的分裂和质子通过PO池和细胞色素b6f的输入，持续的光合作用促进了类囊体管腔和叶绿体基质之间的质子梯度。这种管腔酸化导致psbS(主要是植物和苔藓)和lhcSR(藻类和苔藓)中可质子化残基的质子化。吸收较少色素的psbS响应，与LHCⅡ亚基CP29相互作用并激活NPQ。lhcSR结合叶黄素和叶绿素，并在LHC中充当多余能量的“天坑”。因此，它可以从LHCⅡ中吸收和清除多余的能量。当光能超过可用于光化学的量时，LHC和RCs中受激发的叶绿素可能通过与其他叶绿素或类胡萝卜素的相互作用将多余的能量以热的形式消耗掉。在HL过程中，黄素循环被激活:紫黄质被VDE去环氧化为玉米黄质(通过花青素)，从而放松兴奋的叶绿素和阻止ROS形成的作用。剩余的多余能量激发叶绿素进入三重态，与氧气反应形成ROS，进而破坏光合反应中心和LHC亚基，导致光抑制。在受损蛋白质的周转过程中，它们作为叶绿素的临时储存库(参见图2)。

由于LHCs能显著增强PSⅠ和PSⅡ捕获足够光进行有效光合作用，使得真核光合生物能够在各种光受限的栖息地中进化和繁衍。然而，在高强度光照（HL）或光合电子流被抑制的情况下，LHCs的高效天线特性存在问题，可能会增加光抑制（PI）。当光系统（PSs）吸收的能量达到饱和时，嵌入在LHC中的叶绿素被激发，获得的能量超过了光化学反应中心实际能够利用的能量，导致叶绿素三重态的形成。这些叶绿素三重态与氧气反应，形成有害的活性氧（ROS）（图1）。类似地，活性氧（ROS）在光系统Ⅱ（PSⅡ）和光系统Ⅰ（PSⅠ）的反应中心（RC）中产生，可能会引起光抑制（PI），这是一种由于光系统（主要是PSⅡ）受损速度超过修复速度而抑制光合作用的状态（图1和图2）。在光抑制（PI）期间，光合作用下降到生物体可能无法生存的程度。光合生物采用各种机制来最小化光抑制（PI）的影响：减少天线（LHC）的大小以限制过量光能的捕获[4,5]，通过非光化学猝灭（NPQ）过程进行能量耗散[6,7]，快速修复受损的光合元件[8–10]（图1和图2）。LHCs主要作为结合叶绿素的天线来收集光能并将其输送到反应中心（RC）（图1和图5）[11–14]，同时它们也参与了过量能量的猝灭。其在能量猝灭中的作用有一个重要且被广泛描述的例子是在暴露于高强度光照（HL）时激活高度保护性的叶黄素循环：与LHCⅡ结合的类胡萝卜素——紫黄质，通过紫黄质去环氧化酶（VDE）以两步方式首先去环氧化为玉米黄质，然后转化为叶黄素。叶黄素随后猝灭附近激发叶绿素的过量能量，并防止有害ROS的产生，从而保护了光系统Ⅱ（PSⅡ）（图1）。

LHC蛋白包含三个跨膜（TM）螺旋，其中两个与高光（HL）诱导蛋白（HLIP）同源（图3a、b），并包含一个被称为LHC基序的保守氨基酸序列，以及保守的类胡萝卜素位置和光收集叶绿素结合位点[15]。有趣的是，研究发现LHC蛋白是从不参与光捕获而参与保护光系统（PS）的反应中心以免受过量光照的影响（图1、2和5）的蛋白质进化而来的（图4）。这些LHC-like蛋白在结构上与LHC蛋白有许多相似之处（图3a、b），在其跨名片螺旋中包含LHC基序（表1），并且大多数能够结合色素。

图2。HLIP/OHP、ELIPs和SEP/Lil在PSⅡ修复周期中的作用。处于HL期间，生成的ROS主要损伤PSⅡ反应中心蛋白D1，其次是D2，最后是LHCⅡ亚基。受损反应中心和LHC的叶绿素分别转移到OHP1或ELIP和SEP /Lil，而受损蛋白则被降解。在此期间，兴奋的叶绿素能量通过类胡萝卜素被熄灭。一旦新合成的亚基结合并重新组装PSⅡ，叶绿素就被转移回反应中心，为光合作用收集光。值得注意的是，ELlPs, SEPs和OHPs肯定参与其他机制的调节，包括叶绿素和类胡萝卜素的生物合成。

图3。LHCⅡ和LHC-like蛋白在结构上有着巨大的相似性。(a)已知的LHCⅡ结构(取自pdb id: 6KAF)用绿色表示。用Swiss模型预测了LHC-like蛋白的结构模型。(b) OHP1和psbS预测模型叠加在已知的LHCⅡ结构上。OHP, LHCⅠ和psbS中两个保守的TM螺旋重叠。利用拟南芥中除lhcSR外的相关蛋白序列预测其他模型(包括OHP和SEP)。lhcSR模型用莱茵衣藻序列进行预测。预测的结构用疏水性来表示：红色表示疏水区域，蓝色表示亲水区域。

图4。LHC和LHC-like蛋白的进化。HLIP最初通过原生内共生被引入真核生物，并在其基因转移到核基因组时获得信号肽。OHP1-like蛋白产生了一系列不同的SEPs。OHP2可能是SEP基因缺失的结果，而一小部分保留下来并作为膜锚点，不同的SEP进化成LHC、ELIPs和psbS。

2.LHC-like蛋白不作为天线，而是在防止光抑制中起作用

首个已知的LHC蛋白和LHC-like蛋白的祖先是在高光（HL）胁迫下的蓝藻细菌（Synechococcus）中发现的，并被命名为高光诱导蛋白（HLIP）[19]。现在人们认为，HLIP参与了一系列的基因融合、复制和删除过程，从而产生了所有其他LHC-like和LHC蛋白，其中后者是最近形成的群体[17,20]（图4）。根据它们的结构特征和携带的跨膜螺旋数量，LHC-like蛋白被划分为四个组（表2）。第一组包括具有一个跨膜螺旋的蛋白。它们包括蓝藻中的高光诱导蛋白（HLIPs）和真核生物中的单螺旋蛋白（OHP）或小叶绿素a/b结合蛋白（CAB）蛋白。第二组包括具有两个跨膜螺旋的蛋白，被称为压力增强蛋白（SEP）或LHC-like蛋白（Lil）。第三组包括具有三个跨膜螺旋的蛋白，其中包含早期光诱导蛋白（ELIP）和与压力相关的LHCs（lhcSR）。第四组包含一个具有四个跨膜螺旋的蛋白，名为光系统Ⅱ亚基S（psbS）[20]。LHC-like蛋白在氨基酸序列上通常与LHC蛋白相似，并且在结构上也具有相似性（图3）[16,20,21]。然而，正如上文提到的，它们不参与光捕获以驱动光合作用。相反，有证据表明，这些蛋白中的一些在非光化学猝灭（NPQ）反应中对过量能量的猝灭起到关键作用（图1、2和5及表2）。其中，研究最多的是psbS和与压力相关的LHCs（lhcSR），它们分别存在于陆生植物和藻类中，而苔藓同时携带了它们[6,22,23]（图5）。LHC-like蛋白通常在非应激环境条件下无法检测到，这些蛋白会被各种压力因素诱导，包括低温、有限的营养物质、干燥和高强度光照[24–26]。因此，这些信息表明LHC-like蛋白参与适应生长压力条件的过程。本综述重点关注由高强度光照（HL）诱导的LHC-like蛋白，特别是那些被报道在光保护机制中发挥作用的蛋白。

尽管psbS和lhcSR的光保护作用已经被很好地定义（图5）[23]，但关于其他LHC-like蛋白的光保护机制所知甚少。已经表明的LHC-like蛋白的光保护作用包括：感知类囊体腔酸化、激活光保护性的叶黄素循环、调节叶绿素和类胡萝卜素的合成、修复光系统Ⅰ和光系统Ⅱ等[28–31]。总的来说，LHC-like蛋白在各种压力条件下充当光合作用的守护者。因此，探索它们光保护能力的分子机制是非常重要的。这将增强我们对光抑制（PI）抗性的理解，并可能识别出用于提高农作物光合作用的候选基因。例如，在烟草中转基因表达拟南芥的psbS以及叶黄素循环的关键酶——紫黄质去环氧化酶（VDE）和叶黄素环氧化酶（ZEP），可以导致从高强度光照（HL）到低强度光照（LL）条件下非光化学猝灭（NPQ）驰豫动力学加快，从而加速遮荫下CO2同化恢复。重要的是，田间和温室实验均显示作物产量增加了15%（以干重计），种子产量增加了33%[32–34]。值得注意的是，在地球上最耐光的藻类之一——小球藻（Chlorella ohadii）中，无法检测到PsbS，并且其基因组中完全没有lhcSR[5,35]，这引发了关于这种藻类如何高效确保光抑制保护以及为什么在其进化过程中淘汰了这些光抑制保护因子的问题。在本文中，我们回顾了LHC-like蛋白（LHC-like proteins）的一般特征和光保护作用。我们探讨了通过基因工程改良光保护性LHC-like蛋白来提高农业重要作物的光合作用潜力，讨论了更好地理解LHC-like蛋白光保护功能的重要意义，并提出了未来的研究方向。

图5。psbS、lhcSR和C. ohadii CBR的猝灭机制。HL条件促进类囊体腔酸化。psbS(主要在植物中)在保守的glu残基上质子化(粉红色箭头表示)，其在与LHCⅡ亚基CP29相互作用并激活能量猝灭途径之前经历构象转移(上图)。lhcSR在保守的Glu和Asp残基上发生质子化，也发生构象转移并与LHCⅡ亚基相互作用。多余的能量可以转移到lhcSR并通过类胡萝卜素被猝灭(中)。CBR的作用机制尚不清楚，但有证据表明，一个保守的Glu残基与psbS的一种质子感应谷氨酸盐的位置相同，这表明CBR可能在高度耐光的C. ohadii中作为psbS和lhcSR的替代品(Levin等，2022)[27]。图改编和修改自Pinnola[23]。LHCⅡ和PSⅡ的核心结构取自pdb id: 6KAF。

3.lhcSR和psbS是保护光合作用免受光抑制的应激诱导蛋白

类似于LHC蛋白，lhcSR包含三个跨膜螺旋（图3）。它主要存在于各种藻类谱系和苔藓中，并结合叶绿素和类胡萝卜素[36,37]。在模式绿藻莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）中，有三种基因编码lhcSR：lhcSR 1，以及lhcSR 3.1和3.2，后者共享相同的氨基酸序列。过量光照会触发lhcSR的表达，并使其在几小时内积累[38]。位于lhcSR腔侧的可质子化的保守谷氨酸（Glu）和天冬氨酸（Asp）残基，能感知类囊体腔的酸化[39]，这是由于在高强度光照（HL）下，光合电子流活动增强时质子的摄入导致的结果（图1和图5）。类囊体腔的酸化激活了qe，即非光化学猝灭（NPQ）的pH依赖部分[40]。lhcSR结合叶绿素a、叶黄素和紫黄质，在高强度光照（HL）下，紫黄质通过连续的去环氧化反应转化为玉米黄质（通过花青素），这个过程被称为“叶黄素循环”（图1）。当lhcSR与LHCs结合时，叶黄素猝灭激发态叶绿素分子，从而阻止PSⅠ和PSⅡ中ROS的形成[41]（图1和图5）。

在陆生植物中，psbS是pH传感器，而不是lhcSR。lhcSR有三个跨膜螺旋，而psbS却包含四个（图3），虽然它也携带LHC基序，但对菠菜psbS的结构分析显示其结构过于紧密，无法与叶绿素等色素结合[42]。因此，psbS 可能负责在高等植物中感应质子和激活 qE（由于降低类囊体腔pH 而猝灭能量），但它本身不是猝灭剂。相反，它可能会发生构象变化，从而促进其与其他LHC蛋白的相互作用和激活，以实现能量猝灭，最近的研究指出这可能是小天线 CP29[43]（图5）。有趣的是，苔藓同时含有lhcSR和psbS，这两种蛋白都对非光化学猝灭（NPQ）有贡献[44]。最初在多种生长条件下都无法在模式绿藻莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）中检测到psbS[45]，但最近的研究显示在高强度光照（HL）条件下psbS会被短暂诱导。然而，psbS的积累水平较低，并且在NPQ中的作用相对于lhcSR来说较小[46,47]。令人惊讶的是，psbS似乎在暴露于弱光(LL)水平的昼夜周期中持续表达[48,49]。考虑到这些证据，最近有研究认为在莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）中，psbS可能参与了lhcSR和NPQ的初始激活，以及类囊体膜和LHC蛋白的重组[50]。此外，莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）的lhcSR 1和psbS在类囊体膜中的积累是在UV-B照射下通过UV-8光受体诱导的。在UV-B光下lhcSR 1和psbS的积累导致在随后的高光（HL）胁迫下明显更好的光保护，进而诱导lhcSR 3的积累[51]。尽管大多数研究集中在通过能量耗散保护光系统Ⅱ（PSⅡ），但在高强度光照条件下，UV-B诱导的lhcSR 1介导能量从LHCⅡ转移到光系统Ⅰ（PSⅠ），而不是PSⅡ，从而保护PSⅡ免受能量过剩的影响[52]。

4. 单螺旋LHC-like蛋白(HLIPs/OHPs/ small - CABs)在生物合成和光抑制修复周期中保护PSⅡ

HLIPs（高光诱导蛋白）是在高强度光照胁迫下的蓝藻细菌（cyanobacteria）中发现的[19]，并被认为是所有其他LHC和LHC-like蛋白的最早祖先[17,20]。后来在真核生物中也发现了HLIP同源物[53]，它们被命名为OHPs（单螺旋蛋白）或小叶绿素a/b结合蛋白（small-CABs）。它们拥有一个跨膜螺旋，该螺旋包含一个LHC基序（图3和表1）和色素结合位点[54]。在蓝藻和真核光合生物中，高光诱导蛋白（HLIPs）/单螺旋蛋白（OHPs）在PSⅡ的生物发生和修复中发挥了核心作用。在蓝藻Synechocystis和Synechococcus中，有四个HLIP基因（HliA-D或ScpB-E）[55]，这些基因编码的蛋白能够结合PSⅡ并稳定PSⅠ的三聚体结构，这对于其在高光照（HL）条件下的活性至关重要[56–58]。HLIPs已被证明可以延缓与PSⅡ相关的叶绿素降解，并认为其在PSⅡ亚基被替换时的修复期间暂时结合PSⅡ的色素[56,59,60]（图1和图2）。与这些研究报道的一致，最近的发现揭示了HLIPs是叶绿素结合蛋白复合体的一部分，在PSⅡ的早期组装步骤和叶绿素生物合成中起着重要作用[61,62]。HLIP蛋白的结构模型预测了一个同源二聚体结构，并证明能量通过叶绿素A和β-胡萝卜素之间的直接能量转移而耗散[54]。该蛋白可能通过耗散在PSⅡ修复周期中叶绿素吸收的不能用于光化学反应的过量光能来发挥作用（图1和图2）。

在真核生物中，OHP1和OHP2取代HLIPs，并同样被HL诱导[53,63]。最近的研究表明，它们对PSⅡ组装和叶绿素生物合成至关重要[30,64 - 67]。在拟南芥中，OHP1或OHP2的突变都会导致色素沉积减少、类囊体结构破坏和严重的生长缺陷[66]，而OHP1的缺失会影响核心PSⅡ蛋白的功能，导致PSⅠ蛋白的积累减少[30]。

进一步的研究表明，OHP1和OHP2在PSⅡ生物发生过程中与高叶绿素荧光244 (HCF244)和PSⅡ核心蛋白形成临时蛋白复合物[64,67]，并且OHP的功能完全依赖于其色素结合能力[67]。这些发现表明，与HLIPs类似，OHPs可能在受损的核心蛋白被替换时，暂时与光系统（PSs）结合并结合色素（图1和图2）。

5. 双螺旋LHC-like蛋白(SEPs/Lils)在叶绿素合成中的作用及抗光抑制作用

SEPs/Lils可能在早期真核生物的OHP样蛋白获得第二个不含LHC基序的跨膜螺旋时进化而来（图3和图4）。随后，不同的SEPs通过基因复制产生LHC、ELIP和psbS，其中，LHC和ELIP丢失了第四个螺旋[17,20]（图4）。在拟南芥中鉴定出四种SEPs：研究较少的HL诱导的Lil4和Lil5（以前分别称为SEP1和SEP2）以及在任何光照条件在都保持恒定水平的Lil3.1和Lil3.2[15,68]。虽然它的表达不依赖于光，但Lil3在黑暗生长的大麦去黄化（转移到光中）的幼苗中形成了一种同源多聚体的叶绿素结合蛋白复合物，表明该复合物的形成依赖于光的调控[69]。Lil3与香叶基香叶基还原酶（GGR）的稳定有关，并被发现与原叶绿素内酯氧化还原酶（POR）有关，后者是叶绿素a生物合成中关键代谢物产生的关键酶[70,71]。在大麦和拟南芥中的其他研究证实了其参与叶绿素生物合成的作用[72,73]。最后，Lil3结合色素，并可以通过从叶绿素a到叶黄素（叶黄素或玉米黄质）的直接能量转移实现NPQ，这表明它与HLIPs类似，也可以在猝灭有害光能的同时将色素转移到最终目的地[74]。与HLIPs/ OHPs相比，Lil3与LHCⅡ亚复合物而非PS核心相关，这可能表明其在PI期间具有不同的光保护靶点[72]（图2）。

6.三螺旋LHC-like蛋白（ELIPs）在保护光抑制中发挥重要作用

与SEPs一样，ELIPs与LHC共定位，并且与lhcSR和LHC相似，包含三个跨膜螺旋，并在HL胁迫下积累[20,75 - 77]。ELIPs结合叶绿素a和大量叶黄素分子，因此被认为可以清除在LHC蛋白周转期间未与LHC结合的激发态叶绿素，从而防止活性氧（ROS）的形成[78,79]（图1和图2）。在拟南芥中鉴定出ELIP1和ELIP2[68]。一个无法快速积累ELIPs的拟南芥突变体（chaos），在暴露于高强度光照（HL）时遭受了漂白和光氧化损伤，这是由激发态叶绿素产生的活性氧（ROS）引起的[80]。在HL胁迫前，ELIP基因的组成性表达足以防止这些影响[80]。此外，ELIP2的组成性表达导致叶绿素、谷氨酰tRNA还原酶和镁螯合酶水平降低，而这两种酶是叶绿素生物合成的关键酶[31]。综上所述，这些观察结果表明，在HL胁迫下，ELIPs与受损LHCs的叶绿素结合，同时抑制叶绿素合成，以避免激发的游离叶绿素的积累。这一假设后来受到了挑战，因为研究表明，拟南芥的双elip1/elip2突变体与WT一样容易受到PI和光氧化胁迫，并且不积累游离色素[29]。我们注意到，在elip1/elip2突变体中，玉米黄质减少，这可能表明ELIP调节了保护性叶黄素循环。在另一项研究中，在缺乏ELIP2的拟南芥突变体中发现了PSⅡ对PI的增强保护作用，但转基因表达了耐干燥苔藓Syntrichia caninervis的ELIP1/2[81]。在衣藻 （Chlamydomonas）中鉴定出10个ELIP同源物，其中一些是由HL胁迫诱导的[82,83]。HL和冷胁迫共同作用下，ELIP3上调，使莱茵衣藻（C. reinhardtii）在光氧化胁迫下的存活率提高，PSⅡ活性提高[26]。相应地，一个ELIP3敲低突变体显示出显著降低的PSⅡ活性，并且在高强度光照和冷胁迫条件下无法存活[26]。此外，添加活性氧（ROS）猝灭剂减少了ELIP3的表达，表明ROS触发了ELIP3的表达[26]。在绿藻（Dunaliella salina）中，一种ELIP同源物与类胡萝卜素生物合成共调控，因此被命名为类胡萝卜素生物合成相关蛋白(CBR)[84]。CBR与LHCⅡ结合，结合玉米黄质[85,86]，并被认为参与具有高叶黄素和玉米黄质含量的PI保护蛋白复合物的组织和/或稳定[87]。有趣的是，CBR是最耐光的光合生物之一小球藻(Chlorella ohadii)适应HL时细胞中表达上调最多的蛋白[5,27]。对高温下生长的小球藻细胞中CBR积累的分析发现CBR和LHCⅡ共定位，并将其列为最丰富的LHC-like蛋白，具有光依赖性表达模式[27]。值得注意的是，小球藻不含有编码lhcSR的基因[35]，并且发现在HL条件下psbS的表达低于蛋白质组学检测水平[5,27]。这些结果表明，CBR在极度耐光生物（这种生物缺乏lhcSR，表达有限或不表达psbS）光合作用的光保护中起关键作用。有趣的是，已经发现小球藻CBR与上述衣藻的ELIP3同源，后者被证明是由ROS形成诱导的，对其在HL和冷胁迫下的存活至关重要[26,27]。此外，CBR的氨基酸序列分析和结构建模表明，一个保守的谷氨酸与psbS的一个质子感应谷氨酸位于相同的位置，这表明，在缺乏psbS和lhcSR的情况下，CBR可能在高强度光照期间在类囊体腔中感应低pH值（图5）。

7.可溶性色素结合蛋白也有助于光保护

如上所述，LHC和LHC-like蛋白具有明显的结构相似性，位于类囊体膜中，并有助于光保护。这些蛋白质，除了psbS，其他的可以结合类胡萝卜素和叶绿素。此外，可溶性色素结合蛋白也通过NPQ提供了能量耗散的替代途径，从而促进光保护。这些蛋白的结构与膜结合的LHC和LHC-like蛋白显著不同，它们不共享LHC和LHC-like祖先蛋白。在蓝藻中，这样一种蛋白是橙色类胡萝卜素蛋白（OCP）[88]。OCP形成一个同型二聚体复合物，其中每个单体结合一个单一的类胡萝卜素[89]。在感应蓝绿光激活后，OCP经历构象变化并与蓝藻光合天线(藻胆异构体)相互作用。随后，通过其结合的类胡萝卜素，它提供了多余能量的热耗散途径，并作为单线态氧猝灭剂[90-93]。

在植物中，水溶性叶绿素结合蛋白(water-soluble chlorophyll-binding protein, WSCP)就是一个例子[94]。WSCPs形成同源四聚体，与蓝藻OPC相反，每个单体结合一个叶绿素，而不结合类胡萝卜素[95]。 WSCPs的确切功能仍然是个谜；然而，有证据表明，尽管缺乏类胡萝卜素，它仍具有光防护作用。与未结合的叶绿素相比，与WSCP结合的叶绿素对强光的敏感性要低得多，这是由于叶基部分形成了一个物理屏障，屏蔽了叶绿素的可氧化位点，从而防止了活性氧对叶绿素本身的损害[95-97]。此外，转基因植物中WSCP的过表达导致ROS生成减少，凸显了其作为胁迫保护蛋白的作用[98]。

8.LHC-like蛋白在非生物胁迫下增强光合作用和生存能力，其过表达可能提高作物产量

考虑到地球人口的增长和预期的粮食短缺，应该探索和发展增加粮食生产的新方法。改善光合作用作为提高作物生长和产量的手段一直是一个长期的目标[33,34,99 - 101]。为实现这一重要目标而实施的其他技术包括选择耐光株系，提高二氧化碳同化和光转化的效率，以及通过基因工程操纵代谢途径。LHC-like蛋白除了在光抑制保护方面的关键作用外，研究还表明它们有潜力作为提高光合作用的增强剂。在田间种植的烟草中过表达psbS导致对光反应的气孔开度减少，结果使每同化一个CO2分子时水分损失显著减少了25%[102]。如上所述，在从高强度光照（HL）到低强度光照（LL）条件的转变中，烟草中转基因表达拟南芥的psbS以及VDE（紫黄质去环氧化酶）和ZEP（叶黄素环氧化酶）加速了非光化学猝灭（NPQ）的驰豫动力学，这反过来又缩短了在遮荫条件下二氧化碳同化恢复的时间。重要的是，田间和温室试验均使作物产量(以干质量衡量)提高了15%[32]。此外，对大田种植的重要作物大豆采用同样的策略，可使种子产量提高33%[34]。在另一种非常重要的作物水稻中，psbS过表达导致光照波动条件下的更高产量[103]。这些研究证明，通过单独或与其他蛋白质一起过表达LHC-like蛋白psbS，能够增加重要作物的生物量和产量。虽然psbS是研究最多的LHC-like蛋白，但该家族的其他成员也被证明可以增加生物量并在非生物胁迫下提供保护。在缺乏所有lhcSR的莱茵衣藻突变体中，通过热激蛋白启动子控制的lhcSR表达允许对非光化学猝灭（NPQ）进行微调，从而提高光合效率和生物量积累[104]。转基因烟草过表达ELIP（早期光诱导蛋白）显示出在冷冻后的更高存活率，在冷藏后的更高净光合速率，在渗透胁迫后的更高植物鲜重，以及在高强度光照处理后的更高最大光化学效率[105]。如前所述，衣藻中ELIP3的过表达提高了HL和冷胁迫下细胞的存活率。相反，敲低突变体显示出较低的光合作用效率，并在这些条件下迅速死亡[26]。类似地，拟南芥中过表达杜鹃花的ELIP导致对冷冻的耐受性更强，并且在从冷冻中恢复3天后PSⅡ功能更高[106]。最近对过表达OPHs的红藻（Neopyropia yezoensis）的研究没有发现任何明显的光保护增强[107]。相比之下，拟南芥OHP敲除突变体对HL的敏感性更高[108]，不能在土壤上生长[30]，并且表现出生长受损[66]。综上所述，这些研究强调了利用psbS和其他LHC-like蛋白在各种非生物胁迫下保护植物和改善光合作用的潜力。

9.展望

LHC-like蛋白形成了一大群主要由HL诱导的跨膜蛋白，它们能够结合色素并通过从叶绿素到类胡萝卜素的能量转移进行NPQ。这一规则的一个例外是psbS，其包含四个跨膜螺旋，由于紧密排列的结构而不能与色素结合[42]。相反，当类囊体腔酸化时，psbS会被质子化并发生构象变化，然后与PSⅡ相互作用并激活LHCⅡ次要天线CP29中的NPQ[43]（图5）。类似地，在酸性条件下，lhcSR会被质子化并与LHCⅡ蛋白相关联[39]，但与psbS不同，它结合了类胡萝卜素，这为两个光系统中类囊体的过量热能耗散提供了一条途径[41]（图1和图5）。类似地，ELIPs和SEPs 与LHCⅡ亚基结合并结合色素。它们可能的作用包括暂时结合在HL胁迫下从受损LHC亚基中分离出来的叶绿素，同时调节叶绿素合成[72,74,78] (图1和2)。小球藻是地球上最耐光的光合生物之一[35]，一种名为CBR的ELIP同源物在HL下大量积累，并与LHCⅡ共定位[5,27]。小球藻基因组中缺乏lhcSR，并且在LL和HL培养的细胞中未能检测到psbS[5,27]，这使得人们对CBR在这种特殊生物体中的意义和功能产生了疑问。有人提出CBR可能以类似于psbS和lhcSR的方式被激活，因为它们在其腔侧都含有一个保守的可质子化的谷氨酸（Glu）[27]（图5）。与上述蛋白不同，蓝藻中的HLIPs和真核生物中的OHPs似乎与PS核心蛋白相关，而不是与LHC相关，在HL胁迫下，它们还被认为是在高强度光照（HL）压力下从受损核心蛋白中分离的色素的临时储存库，这些色素在它们周转过程中被暂时储存[56,60,64,67]（图1和图2）。本综述中讨论的类囊体样蛋白的功能总结在表2中。

虽然LHC-like蛋白保护PSs免受PI损害的确切分子机制尚未完全揭示，但很明显，它们在光保护中起着关键作用，可以用来提高重要农业作物的产量和生存能力。最近的实验通过过度表达psbS证明了这一潜力，从而提高了作物生产力和粮食产量，同时减少了暴露于波动光下植物气孔开放造成的水分损失[32,34,102,103]。这些结果突出了生物技术的潜力和理解和利用LHC-like蛋白来提高光保护能力的重要性。值得注意的是，psbS是迄今为止研究最多的LHC-like蛋白。然而，如上所述，其他类似LHC的蛋白质已经显示出增加生物量和保护光合作用的能力，并且应该进一步测试它们提高作物生产力的能力。在未来，psbS和其他类似LHC的蛋白质可以通过基因工程引入到重要的作物中，既可以提高产量，又可以通过增强它们对光和其他压力的适应能力来扩大它们的环境生态位。