多肽的荧光(FAM、FITC、Dansyl、TAMRA、Biotin等)标记服务:
FITC
异硫氰酸荧光素(FITC)与羧基荧光素相比更具活性,而且后者需要被激活才能使用。FITC主要是与巯基反应,如还原型半胱氨酸的侧链,尤其是多肽或蛋白中的氨基
对众多应用来说,在化学合成过程中引入荧光标记是很容易的。 如在固相合成过程中,FITC可以与赖氨酸(Lys)或被选择性地脱保护的鸟氨酸(ornithine)侧链,或合成过程中的多肽N端氨基反应。当在N端标记时,建议在最后一个氨基和由异硫氰酸酯与氨基反应产生的硫脲键之间引入烷基间隔器(alkyl spacer),如氨基己酸(Ahx)。
链接切割需要酸性环境,在N端标记FITC的多肽需经历环化作用来形成荧光素,通常会伴有最后一个氨基酸的去除,但当有一个间隔器如氨基己酸,或者是通过非酸性环境将目的肽从树脂上切下来时,这种情况可避免。
空间位阻被认为是在荧光染料前使用Ahx的主要原因,而不是为什么FITC不能直接偶联在多肽上的原因。Ahx或b-Ala均可作为间隔器用于FITC标记的多肽上。image.png
通常,生物素、FITC等染料可任意标记在多肽N端或C端。但我们推荐N端标记,其成功率更高、所需