CY3.5 amine;FITC/CY5/CY7标记伯胺amine

Cy3.5 (Cyanine 3.5) 是一种发红色荧光的花青素类荧光染料。Cy3.5在显影时可以用561nm或者594nm的激光束激发然后用 Texas Red® 相似的滤片观察,它是一种非常常用的标记染料。Cy3.5-NHS可以用来标记蛋白,抗体,多肽,核酸分子,纳米粒等。

Cy3.5-伯胺的水溶性较低,所以在水相的标记反应体系内需要使用有机共溶剂,常用有机溶剂包括DMF,DMSO和乙腈等。如需标记的分子对有机溶剂敏感,可选择磺化花青素(sulfonated cyanine),即磺化-Cy3.5-伯胺( D10031 )。两者的光谱性质几乎一致,因此大部分应用可相互替换。两者的主要区别在于:磺化染料是水溶性的,在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂,并且降低染料在水中聚集的可能性,增强标记效率。

 

注意事项
Cy3.5-伯胺水溶性较低,标记反应可在有机溶剂中进行或者含有机助溶剂的水相中进行。
标记时使用不含氨基的缓冲体系,比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等,它们会和Cy3.5上的伯胺竞争。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

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以上来自小编分享zyl2022.6.14

OpenCV可以通过色彩空间转换函数和图像分割函数来实现光谱拆分应用示例-FITC检测。 首先,将彩色图像转换为HSV色彩空间,HSV色彩空间的H通道可以表示颜色的色相,S通道可以表示颜色的饱和度,V通道可以表示颜色的亮度。然后,根据需要对图像进行阈值分割,得到二值图像。最后,根据二值图像提取感兴趣区域并进行处理。 下面是一个简单的示例代码,用于检测FITC标记的细胞: ```python import cv2 # 读取彩色图像 image = cv2.imread('cell.jpg') # 将彩色图像转换为HSV色彩空间 hsv = cv2.cvtColor(image, cv2.COLOR_BGR2HSV) # 设置阈值,提取FITC标记的细胞 low_green = (50, 50, 50) high_green = (70, 255, 255) mask = cv2.inRange(hsv, low_green, high_green) # 对二值图像进行形态学操作,去除噪点 kernel = cv2.getStructuringElement(cv2.MORPH_RECT, (5, 5)) mask = cv2.morphologyEx(mask, cv2.MORPH_OPEN, kernel) # 提取感兴趣区域 contours, hierarchy = cv2.findContours(mask, cv2.RETR_EXTERNAL, cv2.CHAIN_APPROX_SIMPLE) # 绘制感兴趣区域 for contour in contours: cv2.drawContours(image, [contour], 0, (0, 255, 0), 2) # 显示结果 cv2.imshow('FITC Detection', image) cv2.waitKey(0) cv2.destroyAllWindows() ``` 在上述代码中,`cv2.cvtColor`函数用于将彩色图像转换为HSV色彩空间,`cv2.inRange`函数用于根据阈值提取FITC标记的细胞,`cv2.morphologyEx`函数用于对二值图像进行形态学操作,去除噪点,`cv2.findContours`函数用于提取感兴趣区域,并使用`cv2.drawContours`函数绘制感兴趣区域。最后使用`cv2.imshow`函数显示结果。 注意,在使用`cv2.findContours`函数时,需要根据OpenCV的版本进行调整。在OpenCV 3.x版本中,`cv2.findContours`函数返回两个值,而在OpenCV 4.x版本中,`cv2.findContours`函数只返回一个值。
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