FITC标记海藻糖制备过程:
步骤一、称取海藻糖50 mg溶于3 ml DMF中,加入丁二酸酐(1.0 eq.)、DMAP(0.1 eq.)和三乙胺(TEA,1.0 eq.)溶解完全,60 °C下反应2 h。
步骤二、制备羧基化的海藻糖
倒入大量冰乙醚中沉淀,离心收集产物,将产物重复溶解沉淀2次,得到羧基化的海藻糖。
步骤三、制备FITC-海藻糖粗品:
称取羧基化的海藻糖10 mg溶于2 ml DMF,加入5-氨基荧光素(1.2 eq.),DIC(1.2 eq.)和DMAP(0.1 eq.)溶解完全,40 °C下反应6 h,倒入大量冰乙醚中沉淀,离心收集产物,将产物重复溶解沉淀2次,得到FITC-海藻糖粗品。
步骤四、提纯:
将粗品采用无水乙醇和乙醚的混合溶剂重结晶3次,得到FITC-海藻糖纯品。
FITC-海藻糖的合成路线
除了上述FITC标