多光谱技术

多光谱成像技术是基于成像学和光谱学发展起来的一门新兴技术，作为一种分析工具，可应用包括生物医学在内的很多不同的研究领域。多种荧光同时标记时，经过单色光的激发，其多种荧光信号混合在一起，通过液晶可调谐滤光片对所需的波长进行滤光和电荷藕合元件的采集，然后经过信号解混合系统将采集到的多种混杂的光混解，经过信号的输出和显示，可直观的观察到不同颜色的标记的生物阳平的不同成分或定位，多光谱成像和普通成像技术的较大区别不同之处就是能偶获取每一张图像上的么一个像素点的高分辨率的光谱，而不是肉眼所见的红蓝绿三色图像。

多光谱的成像技术特点：
组织的自发荧光限制了荧光染料在体内成像的应用，在活体种动物中，动物肠胃内容物，皮肤等均有很强的荧光信号，特别是当激发光为蓝色或者是绿色时尤为明显，通过利用近红外发射波长的荧光染料，可以减少光的散射，吸收自发的荧光，但是自发的荧光仍然限制着成像的灵敏度，成像依然不是很理想，而通过多光谱的成像技术，可以消除自发荧光的影响槊，使得其在多荧光标记和混合标记方面有很好的应用。多光谱成像技术可以适用于各种染料如传统的荧光染料，明视野下的苏木精，二氨基联苯胺等。传统的荧光染料如蛋白质，荧光蛋白作为一种报告分子，他们可以示踪细胞位移和亚细胞的生物过程，如基因表达和信号转导等。近年来发展起来的新型荧光探针如量子点，以其良好的光学特性，尤其用于多光谱成像系统。

1.  多光谱与高光谱
   光谱成像技术，其本质是充分利用了物质对不同电磁波谱的吸收或辐射特性，在普通的二维空间成像的基础上，增加了一维的光谱信息。成像光谱可以同时获取影像信息与像元的光谱信息，根据光谱分辨率不同介绍下多光谱成像、高光谱成像技术；
   多光谱技术（Multispectral）：目标物波段数在3~30之间（通常大于等于3个）；
   高光谱成像（Hypespectral）：目标物波段数在100~300之间，光谱分辨率一般会更精细。
   

高光谱成像是一种基于光谱分析的新技术。它收集数百幅不同波长的图像对于相同的空间区域。收集到的数据形成一个所谓的高光谱立方体，通常图像的横纵坐标分别表示光谱的波长和光谱强度。该数据立方体由沿着光谱轴的以一定光谱分辨率间隔的连续二维图像组成。

1.  多光谱或高光谱简单分类
   

从光谱信息的获取方式来看，高光谱成像主要存在以下两大类，如图4：
（1） 基于扫描方法（多次曝光），该方法还可分为3种形式：点扫描、线扫描、谱扫描；
（2） 计算成像方法（单次曝光的高光谱成像）；

1.  高光谱与多光谱的区别
   

   很多时候材料的反射率特征光谱相对于波长的变化可能非常复杂，而其他微小特征使用较粗糙的多光谱成像方法也有可能无法分辨。
   
   上图中使用多光谱成像（左）识别无法分辨的物质，通过使用高光谱成像（右）被分辨出来。其原因是由于高光谱具有更多的光谱频带，因此可以通过更高的光谱分辨率准确地获得更复杂的指纹特征。

   总结来说，高光谱相对多光谱有以下优势：

l 通过更高光谱分辨率获得更复杂、更精准的光谱特征信息；

l 获取更丰富的光谱波段信息，应用场景更丰富；

l 可用一套硬件根据应用灵活选择光谱序列，免去系统重新设计的过程；

1.  高光谱成像技术关键参数
   对于多种多样的光谱成像技术如何评价和了解，可以重点关注空间分辨率、光谱分辨率和准确率等主要参数，同时关注成像系统在设计复杂度、物理尺寸、系统成本、可量产性、可靠性方面。总的来说，就是得到一个稳定可靠的高质量的光谱图像，是整个技术的核心。下面简单介绍几个关键参数。
   

空间分辨率（Spatial Resolution）

  空间分辨率是评价传感器性能和图像的重要指标之一，同样也是用成像像素来表征空间分辨率，一般分辨率在一百万以下。

光谱分辨率（Spectral Resolution）

   指光谱系统所选用的波段数多少、各波段的波长位置、及波长间隔的大小。即通道数、中心波长、带宽三个因素共同决定光谱分辨率，可理解为能够区分或识别光谱中各波段光的能力。与光谱仪的分辨能力密切相关。分得愈细，波段愈多，光谱分辨率就愈高。

   光谱分辨率是一个概念，狭义的光谱分辨率仅指波段宽度，如何计算需要一个指标，半波宽度就是这个指标。

半峰全宽（Full width at half maximum）

  英文简称FWHM，也称作半高全宽、或半高宽、半波宽。指达到光谱峰高一半处的光谱宽度。如下图。半波宽是衡量高光谱成像系统的一个关键技术参数，可表征其对光谱细分和区分的能力。多光谱常见半波宽在10-1λ量级 ，高光谱通常在10-2λ量级。

光谱采样率
通俗理解为通道数，即能获取的不同中心波长的波段数。多光谱常见3-30个 ，高光谱通常在100-300个。相同条件下，高光谱成像系统支持的通道数的多少，由光谱调节精细度、灵活度决定。

可靠性

  毕竟光谱信息属于光与物体相互作用所产生的信息，比较敏感。那么稳定性、一致性、抗震动等就变得非常重要。有很多的器件随温度变化、机械和时间变化形成的漂移是成像系统的主要误差来源，实际应用中的测试精度很大依赖于成像系统在此方面的稳定性。主要关注温度漂移特性、震动稳定性等。没有稳定一致的物理数据采集，要保证基于数据的算法运行有良好应用效果有很大难度。

1.  高光谱主流技术类型分析
   

   目前高光谱成像技术发展迅速，主流常见的包括光栅分光、声光可调谐滤波分光AOTF、液晶光学滤波LCTF、棱镜分光、芯片镀膜、法珀腔MEMS芯片等。下面简单介绍现基本原理和差异：

光栅分光

   空间中的一维信息通过镜头和狭缝后，不同波长的光按照不同程度的弯散传播，这一维图像上的每个点，再通过光栅进行衍射分光，形成一个谱带，照射到探测器上，探测器上的每个像素位置和强度表征光谱和强度。一个点对应一个谱段，一条线就对应一个谱面，因此探测器每次成像是空间一条线上的光谱信息，为了获得空间二维图像再通过机械推扫，完成整个平面的图像和光谱数据采集。

棱镜分光
入射光通过棱镜后被分成不同的方向，然后照射到不同方向的探测器上进行成像。棱镜分光后，在棱镜的出射面镀了不同波段的滤光膜，使得不同方向的探测器可以采集到不同光谱信息，实现同时采集空间及光谱信息。

由于系统是基于单个分立器件的，为了保证空间分辨率和光谱分辨率，必须引入物镜、光阑、准直器、各类透镜等光学器件，同时必须考虑各种器件之间的聚焦、准直问题，这就导致传统的系统复杂度很高、体积较大、成本颇高、应用范围受到极大限制。针对不同应用要求的修改，系统再设计复杂度非常高。目前市场上主要这类系统多为面向科研及大型检测单位应用。

声光可调谐滤波分光(AOTF)

  AOTF由声光介质、换能器和声终端三部分组成。射频驱动信号通过换能器在声光介质内激励出超声波。改变射频驱动信号的频率，可以改变AOTF衍射光的波长，从而实现电调谐波长的扫描。

AOTF系统组成：成像物镜+准直镜+偏振片+晶体+偏振片+物镜+detector，为了保证入射光经过准平行镜之后能够完全变化成平行光，因此对前端的物镜视场角有一定的要求。本技术的缺陷是无法做大尺寸，目前可看到的只是单点的光谱仪。

液晶光学滤波（LCTF）

 LCTF滤光型光谱成像技术特征是：施加不同的电压，调节双折射液晶造成的相位差，从而使不同波长的光发生干涉，实现对不同波长的连续可调性扫描。基本结构如下：

LCTF的液晶对外界的环境温度非常敏感，造成温漂，使检测结果不准，另外的缺陷就是成本高，无法降低，至今从研究成果和已推出市场的产品看，技术路线不是太乐观。

芯片镀膜

  欧洲微电子研究中心IMEC在这方面投入了大量的研究，采用高灵敏CCD芯片及SCMOS芯片研制了一种新的高光谱成像技术，在探测器的像元上分别镀不同波段的滤波膜实现高光谱成像。如图所示

该方式在CMOS表面镀膜，对应带来的限制空间解析度较多低，要求每个镀膜高度一致性，那么芯片生产工艺要求高，对批量生产有很大挑战。也因为无法全光谱连续可调，在应用场景不灵活，会有一定的限制，一般可作定性。

法珀腔MEMS芯片

   法布里-珀罗干涉仪简称FPI或法珀腔，是一种由两块平行的玻璃板组成的多光束干涉仪。特性为当入射光的频率满足其共振条件时，其透射频谱会出现很高的峰值，对应着很高的透射率。

基于法布里珀罗腔体原理设计，结合MEMS芯片微加工工艺及成熟的图像传感器技术实现的高光谱成像，能快速实现宽光谱输入，特定光谱选通输出，完成不同光谱图像信息采集。此种方式与现有器件产业链及模组工艺很好地结合，同时拥有这种MEMS器件尺寸极小、性价比高的优点，适合大批量生产。当然这种方式目前全世界只有个别的研究所和公司在研究，技术门槛高。

1.  高光谱成像技术发展趋势与应用展望
   

   高光谱成像技术的物体成分识别在不同应用已得到证明，但现有技术的体积、成本、使用体验都极大的限制了在更多场景应用中的推广和产业化，高光谱成像技术必须快速的降低成本、小型化微型化，并且在使用体验方面更加便捷。

   高光谱成像技术，早期是用于航空航天和军事，目前已逐步走出了应用局限，在自然灾害预测、环境保护、生物医学、农林牧畜渔等领域均有非常多应用，甚至很多民用消费和日常生活场景有了更多使用高光谱分析技术的可能。
   
   高光谱成像技术的应用价值已在一些非民用领域得到了证明，但仍存在一些限制其推广进入更多领域的困难，主要有：1）高光谱相机系统复杂、成本高；2）体积大重量沉；3）使用体验是否便捷。目前厂商现正在努力克服这些缺点，随着应用需求扩展，以及传感器设计和技术创新，产业链成熟发展，这些都是高光谱成像推广主要驱动力。如果高光谱相机进入日常生产，例如智能手机、物联网设备，基于新技术带来更丰富应用、更智能功能，生活方式将带来巨大影响，真正让高光谱进入寻常百姓家。
   

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