为什么在 SDS-PAGE 中,蛋白质迁移速度和分子质量(mass)成反比关系?

v ∝ 1 m α 其中  α ≈ 1 v \propto \frac{1}{m^\alpha} \quad \text{其中 } \alpha \approx 1 vmα1其中 α1


一、电泳基本力学模型复习

在电场中带电粒子受到两个力:

  1. 电场力(推它跑)
    F 电 = q E F_{\text{电}} = qE F=qE

    • q q q:粒子所带电荷
    • E E E:电场强度
  2. 摩擦力(阻止它跑)
    F 摩 = f v F_{\text{摩}} = fv F=fv

    • f f f:摩擦系数(取决于形状、大小、黏度、介质结构)
    • v v v:稳定运行时的速度

当达到匀速(steady state)时:

q E = f v ⇒ v = q E f qE = fv \quad \Rightarrow \quad v = \frac{qE}{f} qE=fvv=fqE


二、SDS 加入后的两个变化(关键)

变化 1:电荷 q q q 与质量 m m m 成正比

为什么?

  • SDS 每两个氨基酸分子附着一个负电荷
  • 蛋白越大 ⇒ 氨基酸越多 ⇒ SDS 越多 ⇒ 总负电荷越多

所以:

q ∝ m q \propto m qm

即:蛋白的总电荷与它的质量成正比


变化 2:摩擦阻力 f f f 与质量 m m m 的关系

这个更难理解一些,但我们可以这样想:

  • 在 SDS-PAGE 中,阻力来自于凝胶的网状结构对蛋白“通行”的阻碍
  • 实验发现:大分子越大,被凝胶“卡住”的概率越高,阻力越大

所以经验上:

f ∝ m α 其中  α ≈ 1 f \propto m^\alpha \quad \text{其中 } \alpha \approx 1 fmα其中 α1

这不是一个简单几何形状推出来的,而是大量经验数据拟合的结果(由 Laemmli 等人提出)


三、代入推导公式

我们回到原式:

v = q E f v = \frac{qE}{f} v=fqE

现在代入两个比例关系:

  • q ∝ m q \propto m qm
  • f ∝ m α f \propto m^\alpha fmα

所以:

v ∝ m m α = 1 m α − 1 v \propto \frac{m}{m^\alpha} = \frac{1}{m^{\alpha - 1}} vmαm=mα11

如果 α = 1 \alpha = 1 α=1,那么:

v ∝ 1 m 0 = 常数 v \propto \frac{1}{m^0} = \text{常数} vm01=常数

这代表:如果阻力和电荷都正比于质量 ⇒ 大小就不影响速度
但实验中不是这样。


实际上,在凝胶中观察到:

v ∝ 1 m α ( α ≈ 1 ) v \propto \frac{1}{m^\alpha} \quad (\alpha \approx 1) vmα1(α1)

也就是说,迁移速度和质量大致成反比


四、实验现象:迁移距离和 log(质量) 成反比

因为电泳一般跑一段时间之后记录迁移距离 d d d,它与速度成正比:

d = v ⋅ t ( 时间固定 ) d = v \cdot t \quad (\text{时间固定}) d=vt(时间固定)

所以:

d ∝ 1 m α ⇒ log ⁡ m ∝ − d d \propto \frac{1}{m^\alpha} \quad \Rightarrow \quad \log m \propto -d dmα1logmd

也就是说:

  • 跑得越远 ⇒ 分子质量越小
  • log(分子质量) vs 迁移距离 是线性关系 ⇒ 方便作图与分析

总结公式关系

变量关系
电荷 vs 质量 q ∝ m q \propto m qm (SDS 作用后)
阻力 vs 质量 f ∝ m α f \propto m^\alpha fmα (实验经验, α ≈ 1 \alpha \approx 1 α1
速度 vs 电荷 & 阻力 v = q E f v = \frac{qE}{f} v=fqE
合并后速度 vs 质量 v ∝ 1 m α − 1 v \propto \frac{1}{m^{\alpha - 1}} vmα11 或近似 1 m \frac{1}{m} m1
迁移距离 vs 质量 d ∝ 1 m α or log ⁡ m ∝ − d d \propto \frac{1}{m^\alpha} \quad \text{or} \quad \log m \propto -d dmα1orlogmd

最终解释一句话总结:

SDS 把蛋白都变成“电荷和质量成比例”,再通过凝胶提供的质量相关阻力,让迁移速度变成“与质量成反比”的形式,从而根据迁移距离判断蛋白大小。

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