肽键肽链内部分的计算机术语大全,生化资料

3、 4. 解吸附阶段：用梯度缓冲溶液洗脱，先洗下弱吸附物质，后洗下强吸附物质

5.再生阶段：用原始平衡液进行充分洗涤，既可重复使用

亚基与原体

四级结构的蛋白质中每个球状蛋白质称为亚基。亚基一般只是一条多肽链，但有的亚基由二条或多条肽链组成，这些多肽链之间以—S—S—相连。四级结构有时还指相同的或不同的球蛋白分子所构成的聚合体。对称的寡聚蛋白质可视为两个或多个不对称的相同结构成分组成，这种相同结构成分称为原体(protomer)。在同多聚体中原体是亚基，但在杂聚体中原体是两种或多种不同的亚基组成。

蛋白质变性后的变化

由于外界因素的作用，使天然蛋白质分子的构象发生变化，导致生物活性丧失及物理化学性质的异常变化，这一过程称为变性(denaturation)。变性涉及次级键的断裂，但不涉及共价键(肽键和二硫键) 的断裂,因而一级结构并未破坏。

①生物活性的丧失

②侧链基团的暴露

③物理化学性质的改变: 溶解度.分子形状. 粘度等.

④化学性质的改变变性后的蛋白质肽链松散，内部侧链基团暴露，易于与有关显色试剂接触，使颜色反应增强。

⑤生物化学性质的改变:易被蛋白酶水解

变性机理

①温度：温度升高，使分子内振动增强，破坏维系空间结构的次级键的作用(主要是氢键)，使蛋白质变性。

②酸、碱：主要是由于解离基团质子得失后，生成过多正或负电荷，使肽链间静电斥力增加的结果

③有机溶剂

A. 由于有较低的介电常数，常使肽链内静电斥力增加，造成蛋白质分子膨化或松散；

B. 在极性较低的有机溶剂环境中，疏水基团易于从内部向外部转移，使疏水作用力削弱，促进蛋白质的变性。

④重金属盐

在溶液中加入重金属盐类也会影响蛋白质构象的稳定性。重金属盐有可能和蛋白质的极性基团直接作用，使稳定性发生变化，也可能通过改变溶剂的结构间接影响蛋白质的结构。

鉴定变性的方法

①测定蛋白质的比活性

②测定蛋白质物理化学性质的变化

③测定蛋白质生物化学性质的变化

④用免疫法测定蛋白质的抗原性是不是改变

⑤蛋白质的溶解度是不是下降。

蛋白质组学研究内容

蛋白质组学的主要研究内容：

1)、蛋白质组表达模式(或蛋白质组组成)的研究，了解某种特定的细胞、组织或器官制造的蛋白质种类

2)、蛋白质组功能模式(目前主要集中于蛋白质的相互作用网络关系)的研究

3)、描绘蛋白质的精确三维结构，揭示其结构上的关键部位，如与底物结合并且决定其活性的部位

研究方法：

蛋白质组学研究的策略和趋势：

策略包括穷尽法和差异法；研究趋势包括：相互作用蛋白质组学、亚细胞蛋白质组学、定量蛋白质组学。分离技术：

1)、双向聚丙烯酰胺凝胶电泳：

第一向进行等电聚焦电泳，根据蛋白质的等电点不同对蛋白质进行初步分离。

第二向是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，按照分子量不同对蛋白质进行再次分离。

2)、高效液相层析：

其第一向根据分子大小分离蛋白质，第二向反向层析(固定相和流动相所有溶剂相反)。

鉴定技术：