细胞制备流程图_细节处理不好？来，手把手教你正确制备细胞周期实验样品

细胞周期分析是分子生物学常用的实验方法，尤其在抗肿瘤药物研究上使用普遍。 但 细节处理不好，做得再多也做不出正确的、好看的分布图 。

今天来策下如何准确制备细胞周期测试的样品，真的是百试百灵哦！

简单介绍下实验原理

碘化丙啶(PI)是一种核酸染料，可以与 DNA 和 RNA 结合，但其不能透过正常的细胞膜，所以对活细胞无染色作用。可通过冷乙醇或其他破膜剂的作用，使细胞膜通透性增加。

PI 进入细胞内后，选择性地与核酸结合，RNase 裂解 RNA 后，细胞内染料的荧光量与细胞核内的 DNA 含量成正比。

通过流式细胞仪检测单个细胞荧光强度得到相对 DNA 含量，根据各个时相 DNA 含量不同，将细胞分为不同的周期。

细胞周期实验流程图

具体操作流程及注意事项

1、将对数期的细胞接种于 6 孔板中(2×105 个 / 孔，根据细胞大小、增值速度适当调整)，每孔加 2 ml 培养基培养。

2、细胞贴壁后(根据细胞具体情况)，去除培养基，分别加入培养基配置的不同浓度药物 1 ml 孵育(不使用造成细胞大量死亡的药物浓度和孵育时间)。