ctab法提取dna流程图_CTAB法提取植物基因组DNA过程图示

CTAB法提取植物基因组DNA过程图示

主要试剂：

(1) 1M Tris-HCl (pH8.0)

(2) CTAB分离缓冲液

2% CTAB， 1.4mol/L NaCl， 20mmol/L EDTA， 100mmol/L Tris-HCl (pH8.0)，0.2%β-巯基乙醇，3% PVP共100ml：2g CTAB，8.18g NaCl， 0.74g EDTA.2Na.2H2O， 3g PVP， 加入10ml 1mol/L的Tris-HCl(pH8.0)，加水定容到100ml。高压灭菌，室温保存(注：β-巯基乙醇不能进行高压灭菌，用时加入即可！)

(3)酚：氯仿：异戊醇(25：24：1)， 氯仿：异戊醇(24：1)

(4)TE缓冲液 10mmol/L Tris-HCl (pH8.0)，1mmol/L EDTA

(5)3M NaAc  乙醇(75%，95%，100%)

(6)液氮

步骤：

(1)水浴锅升温至65℃，CTAB提取缓冲液置于水浴锅中预热，95%乙醇置于冰箱预冷，

(2)液氮研磨(研磨前研钵先用液氮预冷)注意戴手套，防冻伤！

(2)将粉末转移置2ml离心管中，加入800ul CTAB，充分混匀水浴1h，期间每隔5min，上下轻摇数次