下载最新版的FragPipe 点这里 ,下载第二个包含有Java环境的,第一个要配置Java环境,很麻烦
将压缩包放置在你想要放置的目录下,比如我的放在 D:\SoftwareStore\ 这个路径下解压缩就会得到 FragPipe-jre-22.0
现在我们进入 D:\SoftwareStore\FragPipe-jre-22.0\fragpipe\bin下,打开 fragpipe.exe
然后我们就看到了如下的界面,我们要配置MSFragger和Python环境,MSFragger可以在右边按钮直接下载,填写完基本信息之后下载,python环境的话,下载一个Anaconda Download,然后找到base环境下的python路径就可以,或者新建一个python环境,这里的python要求是 Python 3.9, 3.10, or 3.11,不是这些版本都不行。
以上就是基本的配置了。接下来使用这个软件,参考 Using FragPipe | FragPipe (nesvilab.org):
第一步,假如我有一批原始的raw文件,然后根据图示操作即可。
第二步,在Database选项中上传蛋白数据库,若直接上传fasta文件需点击Add decoys添加decoy数据,同时也可在Download中直接下载Uniprot的蛋白数据
第三步,在MSFragger选项中根据需求选择搜库参数,如Precursor/Fragment mass tolerance,Missed cleavages等。
第四步,在Quant (IsoBaric)中可点击Edit/Create查看annotation.txt的内容是否有误。在Group by中可选择输出文件的层次如PSM,Peptide,Protein等
第五步,在Run选项中选择输出文件位置,随后点击RUN开始搜库