ELISA(免疫酶联吸附实验)是免疫学基础实验之一,大部分生命科学领域的科研工作者对其都不陌生。因为其特异性强,灵敏度高,可精确定量的特性,在基础科研和临床诊断中,ELISA技术都应用广泛,相信很多关注我们的小伙伴也都做过ELISA。
ELISA实验步骤少,流程短,购买的即用型试剂盒也都有指导性很强的操作说明书,单次实验3-6小时即可得到结果,实验小白也可以很快的上手。但是,各位同学可不要轻视哦,ELISA和WB、IHC等基础免疫实验一样,都是易学难精,上手容易,但想要得到稳定的结果,还是要花一点心思的。爱必信在这里汇总了一些做ELISA的客户咨询我们的问题,把其中有代表性的集中做成了FAQ,大家快看看这其中有没有困扰你ELISA实验的问题吧~
Q: ELISA可以检测胞内蛋白么?
A: 可以的,大部分ELISA指标均为炎症因子、趋化因子等分泌类型蛋白,支持的样本类型也多为血清、血浆、细胞培养上清等液体样本。如需检测胞内蛋白,首先需要确认待测指标是否在胞内表达,然后选用支持组织匀浆样本的ELISA试剂盒即可,将组织样品或细胞样品进行裂解,提取胞内蛋白后进行蛋白定量,保证每孔上样总蛋白量一致即可。
Q: ELISA可以测DNA的表观么?
A: 不可以,ELISA是利用免疫学原理,定量检测蛋白质表达的技术。测DNA表观遗传学,主要是检测DNA甲基化,可以选用ChIP技术。
Q: 夹心法ELISA实验中的捕获抗体和检测抗体是同一个抗体么?
A: 不是的,在双抗夹心法ELISA实验中,会同时用到捕获抗体和检测抗体,这两个抗体是针对同一抗原蛋白的不同抗原位点的两种抗体,这样才可以同时结合抗原分子。这也是双抗夹心法ELISA不适用与小分子抗原和半抗原等待测指标的原因。
Q: 试剂盒里面有捕获抗体么?
A: 即用型ELISA试剂盒中,捕获抗体已经预包被至试剂盒中的ELISA板上,没有单独的捕获抗体提供,直接使用ELISA板孵育稀释后的样本及标准品即可。非即用型的ELISA试剂盒会有捕获抗体提供,需按照说明书推荐的工作浓度,用稀释液稀释后自行包被。
Q: 捕获抗体如何