elisa标准曲线怎么做_做标准曲线的13个问题

1、仪器调整到最佳状态，排除仪器的干扰。

2、移取液体体积要精确，保证迅速准确，尽可能用一根移液管；为减小人为误差，同一种液体要一个人操作。

3、保证标准品的纯度，所用标准品最好是新打开的，纯度较高的固体或溶液，防止污染。

4、实验容器要保证洁净。

5、根据标准品理化性质注意加样的先后顺序，一般先低浓度，后高浓度。

6、如果要测中间点回读值，应保证测前标准液体充分混匀。

7、若有某个点误差较大，应舍弃。

8、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。

9、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈s型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段，即曲线几乎成直线的范围内。

10、最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

11、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。

12、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。

13、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数r至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999。

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